survivin反义寡核苷酸提高人肺腺癌A549耐药细胞系对顺铂敏感性的研究

摘要：

目的 探讨存活素反义寡核苷酸(ASODN)体外转染对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/CDDP凋亡及其对顺铂(CDDP)敏感性的影响.方法 常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin ASODN转染细胞,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测survivin mRNA及蛋白表达.通过形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、caspase-3酶活性及细胞凋亡率(AI)的测定,评价细胞凋亡程度.采用MTT法测定细胞存活率和生长抑制率,计算半效抑制浓度(IC50)及耐药倍数(RI).结果 转染组survivin mRNA及蛋白表达下调明显,分别达41.56%和0.864±0.045,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).细胞形态学显示有细胞凋亡改变,表现为细胞核固缩、核边集和核碎裂等;DNA凝胶电泳可见DNA梯形条带;ASODN转染组细胞凋亡率和caspase-3相对活性分别增高至34.03%和1.1298±0.2502,而ASODN+CDDP组增高更为明显,分别达65.85%和1.6805±0.2758,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).ASODN转染组和ASODN+CDDP组生长抑制率分别增高至59.3%和83.7%(P＜0.05);而ASODN转染组细胞对CDDP的IC50由对照组的(225.03±10.59)μmol/L减低至(158.84±4.26)μmol/L,RI由11.9减至8.4.结论 survivin ASODN通过下调survivin的表达,自身诱导了细胞凋亡,并逆转细胞对CDDP诱导的细胞凋亡的耐受,降低凋亡阈值,从而增强了人肺腺癌细胞对CDDP的敏感性.

关键词：survivin ASODN、顺铂、凋亡、人肺腺癌细胞系A549/CDDP、耐药性

所属期刊栏目：28

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2006-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：408-412