内质网应激相关蛋白1对衣霉素诱导HepG2细胞内质网应激的影响

摘要：

目的：研究过表达内质网应激相关蛋白1（SERP1）对衣霉素诱导肝癌HepG2细胞内质网应激的影响。方法以衣霉素诱导HepG2细胞发生内质网应激，将细胞分为以下5组：正常对照组、衣霉素组、衣霉素＋0．25μg SERP1转染组、衣霉素＋0．5μg SERP1转染组和衣霉素＋1．0μg SERP1转染组，每组实验重复3次；采用MTT法检测不同浓度与作用时间的衣霉素对HepG2细胞存活率的影响，以吸光度（A ）值表示。Western blot法检测各组细胞内内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白（GRP78）、C／EBP同源蛋白（CHOP）以及钙联蛋白的表达水平。采用SPSS 15．0统计软件进行统计学分析，比较蛋白表达水平。结果与对照组相比，衣霉素处理组HepG2细胞中内质网应激标志性蛋白GRP78、CHOP及 Calnexin 蛋白表达量显著升高，分别为对照处理组的3．8倍（t ＝11．5， P ＜0．05）、1．3倍（t ＝3．498，P ＜0．05）和1．4倍（t ＝4．1，P ＜0．05），差异均有统计学意义；随着SERP1过表达量的逐渐升高，变化呈现剂量依赖性。随着SERP1转染剂量的增加，各组GRP78蛋白的表达较单独衣霉素处理组分别下降了12％[（1．83±0．29）A值，（1．61±0．13）A值，t ＝2．36， P ＞0．05]、24％和30％[（1．83±0．29）A值，（1．40±0．11）A值，（1．27±0．21）A值；F ＝50．56， P ＜0．05]，CHOP蛋白的表达水平分别下降了23％，29％和34％[（1．0±0．15）A值，（0．79±0．07）A值，（0．72±0．55）A值，（0．67±0．14）A值；F ＝9．532，P ＜0．05]，Calnexin蛋白的表达水平分别下降了5％[（1．20±0．18）A值，（1．15±0．13）A值；P ＞0．05]、24％和28％[（1．20±0．18） A值，（0．92±0．07）A值，（0．87±0．18）A值；F＝8．116，P＜0．05]。结论外源性过表达SERP1蛋白通过下调内质网应激蛋白的表达，降低HepG2细胞内质网应激水平，缓解内质网应激介导的细胞损伤。

关键词：内质网应激、内质网应激相关蛋白1、葡萄糖调节蛋白78、C/EBP同源蛋白、钙联蛋白

分类号：R73;R57

资助基金：国家自然科学基金81370956；上海交通大学无锡研究院交大专项资金2011JDZX021

在线出版日期：2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：32-37