Walk突变致异质性万古霉素中介耐药 金黄色葡萄球菌生物学特性研究
目的 观察Walk基因突变所致的异质性万古霉素中介耐药金黄色葡萄球菌(h-VISA)的生物学特性变化,进一步揭示h-VISA对万古霉素敏感性下降的机制.方法 收集山东省11家三甲医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株200株,用含有16 g/L的胰酶消化酪蛋白和4μg/ml的万古霉素脑心浸液琼脂筛选法进行初筛h-VISA,菌群分析曲线法(PAP/AUC)对初筛阳性的菌株进行确认.Illumina Hiseq 2500测序技术对筛选出的h-VISA进行全基因组测序,观察有无Walk基因的突变.透射电镜观察其细胞壁的厚度,利用Trinton-X 100对细胞的破坏性原理,检测Walk突变h-VISA菌株的自行活性,RT-PCR技术测定W alk基因调控的细胞壁代谢相关基因的表达情况.结果 200株MRSA菌株中初筛阳性的h-VISA菌株有14例,PAP-AUC方法最终确认h-VISA菌株有6株,6株h-VISA菌株中,5株检测到Walk基因的突变,突变方式均为点突变;W alk基因突变的h-VISA菌株细胞壁较其他菌株明显增厚(P<0.05);Trinton-X 100诱导的Walk突变阳性的h-VISA菌株自溶能力较其他菌株明显减弱(P<0.05);walk基因调控的细胞壁代谢相关基因如atlA,ssaA,isaA,lytM表达明显下调(P<0.05).结论 在h-VISA菌株中,存在较高比例的walk基因突变,突变的h-VISA菌株通过下调细胞壁代谢相关基因的表达,导致其细胞壁明显增厚,自溶活性明显减弱,使其对万古霉素敏感性减弱.
walk突变、异质性、金黄色葡萄球菌、细胞壁
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R378.1+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
山东省重点研发基金资助项目2018GSF118222
2020-08-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
1964-1969
