多重PCR检测肠源性脓毒症常见病原菌的方法构建及初步临床应用
目的 构建多重PCR反应体系检测肠源性脓毒症常见病原菌的快速可靠的方法,并初步探索其临床价值. 方法 选择2013年6月-2015年7月医院42例肠源性脓毒症患者,随机分为多重PCR组及对照组,各21例;根据10种肠源性脓毒症常见病原菌(以下简称目标细菌)的16sRNA特异性片段设计互补序列的引物和探针;优化多重PCR反应体系并进行特异性实验及浓度梯度敏感性实验. 结果 多重PCR体系检测10种目标细菌的标准菌株均呈现阳性结果;浓度梯度敏感性实验提示本项目设计的多重PCR反应体系可检测的最小细菌浓度为1×103 CFU/ml,最适宜检测浓度范围1×103~1×106 CFU/ml;多重PCR组检出率显著高于对照组,多重PCR组患者SIRS持续时间、抗菌药物费用与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 本项目建立的多重PCR反应体系具备高通量、精准检测脓毒症患者感染的常见病原菌的能力;初步的临床研究提示该方法在指导肠源性脓毒症患者的抗微生物治疗中有一定的应用价值.
肠源性脓毒症、抗微生物治疗、细菌DNA、多重PCR
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R378(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
浙江省科技厅公益项目2013C33197
2017-05-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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