T n5细胞中单链抗体基因抗人重组质粒分子的表达分析

摘要：

目的：研究 Tn5细胞中单抗抗人重组质粒（B7‐2）基因的表达及其活性。方法基于具备信号肽单抗抗人B7‐2构建，构建系统 Bac‐to‐Bac 并含单抗抗人 B7‐2杆状重组病毒 AcBacmid 单抗 B7‐2，对 Tn5细胞采用不同感染复数（MOI）实施感染，进行24、48、72 h 不同时点细胞蛋白活性的分泌表达，并分析人外周血中单个核细胞受Raji 刺激呈增殖表达，予以单抗抑制的效果。结果应用不同 MOI 对 Tn5细胞感染，达72 h 后进行细胞收集，予以聚丙烯酰氨凝胶电泳（PAGE‐SDS）分析，其 MOI 为1～10表达目的蛋白的量，确定最佳 MOI 为5；M TT 法下自动酶标仪波长570 nm 位置吸光度，其吸光值的大小同细胞 PBMC 增殖可呈正相关；各组吸光值显示细胞Raji 刺激外周血单个核细胞（PBMC）呈增殖表达，单抗抗人 B7‐2可以抑制 Raji 细胞刺激 PBMC 出现的增殖效应。结论单抗 B7‐2抗原抗体相结合的活性，以及对 PBMC 产生的抑制效应均存在，但未见单抗 B7‐2效应明显表达，有待进行更进一步的试验研究。

关键词：表达、基因、抗人 B7-2、单克隆抗体、细胞 Tn5

分类号：R446(诊断学)

资助基金：湖北省科技计划自然科学基金资助项目2011CDB298

在线出版日期：2015-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3121-3124