建立16SrDNA 的 PCR-SBT 法细菌鉴定及在败血症中的应用
目的:建立16S rDNA PCR测序(PCR‐SBT)方法快速鉴定败血症患者体内的细菌菌种。方法对5株标准菌株及临床常见的20属27种细菌进行16S rDNA保守序列PCR扩增,扩增产物经纯化后直接测序,并利用Blast软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的16S rDNA序列,采用Clustal‐X软件进行多序列比对和同源性分析,以确定细菌的种属;同时对124例败血症患者进行血培养并与PCR‐SBT 法比较,探讨其在临床应用中的价值。结果所有细菌菌株通过PCR方法均获得约1500 bp的保守序列,经测序分析后5株标准菌株的序列与预期标准序列完全一致,27种临床分离株测序鉴定结果与生化鉴定结果一致;124例败血症患者中84例PCR法阳性,阳性率67.7%,显著高于血培养的30.6%(P<0.01)。结论建立16S rDNA的PCR‐SBT法鉴定细菌快速可靠,诊断败血症优于传统的血培养法。
16S rDNA、多聚酶链反应-测序方法、败血症
R446(诊断学)
浙江省医药卫生科技计划基金资助项目2010KYA045
2015-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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