梅毒苍白密螺旋体多表位抗原基因的构建、表达及免疫反应性的鉴定

摘要：

目的 为梅毒检测试剂提供特异性强、灵敏度高的新型多表位重组抗原.方法 PCR扩增Tp17和Tp0453基因的优势抗原表位,连接后插入pQE32质粒中构建多表位嵌合重组体pQE32/Tp0453-17,IPTG诱导表达,免疫印迹法检测表达产物的免疫反应性.结果 成功构建了多表位嵌合重组质粒pQE32/Tp0453-17,经酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Tp0453和Tp17基因,片段长约1180 bp,其测序结果与GenBank上登录序列完全一致;SDS-PAGE分析表达产物发现,融合基因表达的重组蛋白Mr约为52×103,表达产物占全菌总蛋白的19.3%,并且在细胞内主要以包涵体形式存在;用Western印迹法检测显示,该重组蛋白能与梅毒患者的阳性血清反应,具有良好的抗原性.结论 成功表达了具有良好免疫反应性的多表位嵌合重组抗原,为新型梅毒快速诊断试剂盒的研究奠定了良好的实验基础.

关键词：苍白密螺旋体、多表位、重组蛋白

所属期刊栏目：18

分类号：R377+.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省教育厅重点课题基金06A061;02A046

在线出版日期：2008-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：25-28