抗脂多糖单链噬菌体抗体在大肠埃希菌中的表达及筛选

摘要：

目的研究小鼠鼠源性的抗脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)单链可变区片段(single-chain fragment variable, ScFv),即在大肠埃希菌TG1中的表达,并筛选出对LPS具有较高亲和力的ScFv. 方法将预先构建好的有效库容量为4.75×106的噬菌体抗体库接种至SOBAG培养基上,隔夜培养后扩容至约1×1010;严格控制lac启动子的表达,仅当加入M13KO7辅助噬菌体后才使ScFv以附着型的形式表达,然后利用LPS淘筛特异性的ScFv,富集的噬菌体阳性克隆重新感染TG1;最后随机挑选出190个菌落在96孔培养板分别培养单个含特异性ScFv的TG1菌落,经间接ELISA检测抗LPS的ScFv. 结果淘筛一轮过后即有3×104阳性菌落长出,190个菌落经间接ELISA检测有两个阳性克隆.结论成功地使鼠抗LPS ScFv在大肠埃希菌中表达,并从中筛选出了两株抗LPS ScFv.

关键词：抗体、脂多糖

所属期刊栏目：14

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金39570042

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：28-30