MICA基因第2～4外显子大规模双向测序及分子克隆检测平台的建立

摘要：

目的 建立稳定的、大规模的MICA基因第2～4外显子双向测序分型检测技术平台,并分析其单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP).方法 自行设计MICA基因第2～5外显子扩增引物及测序引物,探索PCR扩增及测序的最佳反应条件.用商品化的MICA基因单向测序分型试剂盒作为平行对照,对4个包含MICA* 010等位基因的样本采用自行设计引物扩增,并进行分子克隆和单倍体测序.结果 采用自行建立的MICA基因双向测序分型方法验证了100人份平行对照组单向测序分型结果.应用本研究建立的方法获得了中国人群MICA基因第2～4外显子22个SNP位点.两个新等位基因MICA* 065、MICA* 066获得了世界卫生组织的正式命名.首次发现了MICA等位基因第3内含子新的SNP位点,序列已提交IMGT/H LA数据库.结论 建立的MICA基因双向测序方法可大规模应用于中国人群的MICA基因多态性、组织器官移植配型和疾病研究.

关键词：人类主要组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A、双向测序、多态性、基因分型

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资助基金：深圳市科技计划项目200902119;Project No.200902119,supported by the Science and Technology Program of Shenzhen City

在线出版日期：2013-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：542-546