增生性瘢痕成纤维细胞中分泌型凋亡相关蛋白1相互作用蛋白的研究

摘要：

目的 寻找与分泌型凋亡相关蛋白1 (secreted apoptosis-related protein1,SARP1)存在相互作用的蛋白质分子,分析其分子机制.方法 成功构建的重组SARP1腺病毒载体Ad-SARP1,转染进入原代培养的增生性瘢痕成纤维细胞(HSFb).免疫共沉淀法沉淀出蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离后,用考马斯亮蓝染色,对SDS-PAGE胶上切取的电泳蛋白条带进行酶解与质谱分析,根据质谱分析获得的肽序列谱图自动进行数据库搜索.结果 在阳细胞对照组和导入Ad-SARP1感染的细胞当中,均共沉淀出7条蛋白带,相对分子质量分别约为93×103、43×103、40×103、37×103、31×103、26×103和12×103;在未加SARP1抗体组则没有沉淀出蛋白条带.分析蛋白条带得到6个可能与SARP1有相互作用的蛋白,分别为骨膜蛋白前体(periostin precursor或OSF-2)、牙周韧带相关蛋白1(asporin precursor或PLAP1)、磷酸甘油激酶1(phosphoglycerate kinase 1)、未知蛋白rCG50690、载脂蛋白(apolipoprotein A-I,Apo-AI)、硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,TRX1).结论 通过免疫共沉淀法结合液相色谱/质谱联用离子阱检测技术,可以获得SARP1的相互作用蛋白,为研究SARP1调控HSFb凋亡信号通路的作用机制提供了新的线索.

关键词：分泌型凋亡相关蛋白1、增生性瘢痕、成纤维细胞、免疫共沉淀、相互作用蛋白

所属期刊栏目：20

分类号：R318;R733.7;R619.6

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2014-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：381-384