非靶向串联质谱分析人早期胚胎级别与其培养液中相关氨基酸和肉碱水平的关联

摘要：

目的:检测体外培养不同级别早期人胚胎的培养液中氨基酸和肉碱水平，探讨基于质谱的微量分析技术用于评价胚胎体外发育潜能的可行性。方法:从2022年6至12月在临沂市人民医院生殖医学科接受体外受精-胚胎移植治疗的不孕夫妇中，收集女方年龄31.5（26.5，33.25）岁，且获卵数在8~20个的不孕夫妇，从中随机挑选30对不孕夫妇收取其第3天细胞胚的培养液共126份，依据其所对应的胚胎的形态级别分为优（
n=43）、中（
n=49）和差3（
n=34）组。通过液相色谱-质谱联用检测不同培养液中氨基酸和肉碱水平。通过方差分析比较不同组间氨基酸与肉碱水平的差异，通过Pearson相关分析氨基酸与肉碱水平的关联，偏最小二乘法分析氨基酸和肉碱水平与胚胎评估级别的关联。
结果:甲硫氨酸/苯丙氨酸（比值）在优胚、中胚和差胚3组间分别为3.09±1.67、4.00±1.19和4.99±2.04，差异有统计学意义（
F=7.09，
P<0.05），优胚与中胚间（
t=-0.91，
P<0.05）、优胚与差胚间（
t=-1.91，
P<0.05）及中胚与差胚间（
t=-0.99，
P<0.05）差异均有统计学意义。不同氨基酸之间，苯丙氨酸与酪氨酸的正相关性最强（
r=0.99，
P<0.01）；不同肉碱之间，辛酰肉碱与葵酰肉碱比值（C
8/C
10）与（戊二酰肉碱+3-羟基己酰肉碱）/棕榈酰肉碱比值［（C
5DC+C
6OH）/C
16］的正相关性最强（
r=0.44，
P<0.001）；偏最小二乘法拟合模型计算氨基酸/肉碱水平与胚胎级别相关的权重：亮氨酸（异亮氨酸）为2.22，精氨酸为1.99，缬氨酸/苯丙氨酸为1.65，甘氨酸为1.54，酪氨酸为1.21，（戊二酰肉碱+3-羟基己酰肉碱）/辛酰肉碱（C
5DC+C
6OH）/C
8为1.15。
结论:胚胎培养液中亮氨酸、精氨酸、缬氨酸/苯丙氨酸比值、甘氨酸、酪氨酸以及肉碱比值（C
5DC+C
6OH）/C
8与体外培养人早期胚胎级别显著相关。

关键词：氨基酸、肉碱、体外受精、胚胎发育潜能

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资助基金：临沂市人民医院博士启动基金2018LYBS06;山东省自然科学基金ZR2020MH018;Doctoral Fund of Linyi People′s Hospital2018LYBS06;Shandong Province Fund of Natural ResearchZR2020MH018

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：458-463