核酸质谱技术检测常见念珠菌血症病原菌

摘要：

目的:联合聚合酶链反应与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术，构建检测5种临床常见念珠菌血症病原菌的高通量检测方法。方法:方法学建立。以白色念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌为目标菌株，以内转录间隔区为靶基因，设计特异的单碱基延伸引物，在同一反应体系内进行单碱基延伸反应，用MALDI-TOF MS检测各目的菌特征峰；使用模拟血流感染样本验证上述构建的检测体系敏感度、特异度；前瞻性收集2021年10月至2022年9月解放军总医院第一医学中心检验科108例疑似或确诊念珠菌血症患者血液样本并检测；将核酸质谱检测结果与金标准血培养方法进行比较。结果:用所建立的核酸质谱检测体系同时检测5种临床常见念珠菌，各菌种均可产生特异的产物峰且各菌种之间不存在相互干扰。白色念珠菌的最低检测限可达100 CFU/ml，近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌的最低检测限可达10 CFU/ml。对108份血液样本进行检测，核酸质谱的敏感度为94.74%（36/38），特异度为97.14%（68/70），阳性预测值为92.31%（36/39），阴性预测值为98.55%（68/69），配对四格表的χ
2检验显示2种方法无显著差异（
P>0.05），Kappa一致性检验显示2种方法一致性良好（
Kappa=0.9，
P<0.05）。
结论:成功构建了适用临床念珠菌检测的核酸质谱检测体系，方法验证结果与临床血培养具有一致性。

关键词：光谱法，质量，基质辅助激光解吸电离、念珠菌属、分子诊断技术

所属期刊栏目：46

资助基金：国家自然科学基金81871731;National Natural Science Foundation of China81871731

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：402-409