脑脊液miRNA定量检测中内参基因的选择评价

摘要：

目的:探讨常规内参基因U6和Cel-miR-39用于结核性脑膜炎患者脑脊液微小核糖核酸（miRNA）定量检测的可行性，并初步用于脑脊液miRNA定量检测分析。方法:本研究选取首都医科大学附属北京胸科医院常规脑脊液检测后保存的标本，根据最终诊断依据纳入结核性脑膜炎患者36例、病毒性脑膜炎患者34例。提取其脑脊液标本miRNA，采用TaqMan探针法检测miRNA的表达水平。采用GeNorm、NormFinder和Bestkeeper软件分析内参基因miRNA的稳定性，采用2
-ΔCt方法计算靶标miRNA的相对表达量。标本重复检测的一致性分析采用Pearson检验。靶标基因在两组间的表达差异比较采用
t检验。
结果:70份脑脊液标本中，U6检测的循环阈值（Ct）为（30.40±3.30）个循环，表达丰度较低，Cel-miR-39检测的C
t值为（21.49±0.70）个循环，表达丰度适中。内参和靶标基因miRNA在重复样本检测中一致性均较好（
r>0.931,
P<0.001）。根据3种软件分析结果，Cel-miR-39在70份脑脊液标本中表达稳定性更高，更适合作为脑脊液miRNA检测的内参基因。以Cel-miR-39为内参，靶标基因miR-126-3p（1.13±0.41比3.34±0.82,
t=2.452,
P=0.016）、miR-130a-3p（0.56±0.10比2.59±0.70,
t=2.960,
P=0.004）和miR-151a-3p（0.64±0.25比2.11±0.33,
t=3.536,
P=0.001）在结核性脑膜炎组脑脊液中的相对表达量均显著低于病毒性脑膜炎组。
结论:Cel-miR-39可作为结核性脑膜炎患者脑脊液中miRNA定量检测的标准内参，脑脊液中miR-126-3p、miR-130a-3p和miR-151a-3p的相对表达量在结核性脑膜炎患者和病毒性脑膜炎患者之间存在差异。

关键词：结核,脑膜、脑脊髓液、微RNAs、参考值

所属期刊栏目：43

资助基金：北京市自然科学基金7192038;国家自然科学基金81902024;国家科技重大专项2015ZX10004801-003、2017ZX10201301-004;北京市医管局登峰人才项目DFL20181601;通州区运河人才计划YH201807、YH201921;Beijing Natural Science Foundation7192038;National Natural Science Foundation81902024;the National Science and Technology Major Project of China2015ZX10004801-003, 2017ZX10201301-004;the 'Beijing Municipal Administration of Hospitals’ Ascent PlanDFL20181601;the Tongzhou Yunhe ProjectYH201807, YH201921

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：732-738