血清外泌体Annexin A11检测方法学构建及其在胰腺癌中的临床应用

摘要：

目的:探讨胰腺癌（PC）血清外泌体人膜联蛋白A11（ANXA11）的检测方法，初步评估ANXA11在PC中的临床应用价值。方法:选择2016年12月至2019年7月南通大学附属医院确诊为PC、胰腺良性占位、胰腺炎患者的血清标本分别70例、15例、70例，选取同期健康体检者70名作为对照组。利用基于高分辨率、高精度质谱仪的平行反应监测（PRM）方法检测血清外泌体及无外泌体血清中ANXA11蛋白丰度。自建检测人血清外泌体ANXA11的点免疫印迹法（dot immunoblotting）并进行方法学评价；分析所有受试者血清外泌体ANXA11的水平；采用受试者工作特征（ROC）曲线的曲线下面积（AUC）评价ANXA11、糖类抗原19-9（CA19-9）、癌胚抗原（CEA）对PC的诊断效能；分析ANXA11与PC患者临床病理参数、疗效及预后生存期的关系。两组间比较采用Mann-Whitney
U检验，四组间比较采用Kruskal-Wallis检验。
结果:自建的点免疫印迹法检测血清外泌体ANXA11具有较高的敏感度和重复性。利用构建的方法检测研究对象发现ANXA11在PC组升高最明显，与其余三组比较，差异有统计学意义（
Hc=58.079，
P<0.01）。ROC曲线表明，ANXA11（AUC=0.836）对PC的诊断效能高于CEA（AUC=0.656），与CA19-9（AUC=0.870）相当，联合CA19-9可提高诊断PC的敏感度，且保持较高的特异度。PC患者治疗前血清外泌体ANXA11水平与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤生长部位、淋巴结转移、远处转移及TNM分期均无关（
Z值分别为0.052、-0.285、-0.402、0.324、0.888、0.658、1.734，
P均>0.05），且PC患者术后第10天血清外泌体ANXA11水平与术前相比，差异无统计学意义（
Z=-1.569，
P=0.12）。PC患者生存时间与是否存在淋巴结转移、远处转移、TNM分期及治疗方式有关（χ
2分别为9.354、6.086、9.389、16.998，
P均<0.05），而与ANXA11、CA19-9及CEA等无相关性（χ
2分别为1.516、0.011、0.159，
P均>0.05）。
结论:本研究成功建立了检测人血清外泌体ANXA11的方法。血清外泌体ANXA11联合CA19-9可提高PC诊断敏感度。

关键词：膜联蛋白A11、胰腺癌、血清外泌体、诊断、肿瘤标志物

所属期刊栏目：43

资助基金：江苏省科技重点研发面上项目BE2019692;中国博士后基金项目2019M661909;江苏省卫健委面上项目H2019072;南通市科技计划项目MS22018006，MS12019018，MS12019020，MSZ19177;Science and Technology Key R & D Project of Jiangsu ProvinceBE2019692;Postdoctoral Fund Project of China2019M661909;General Project of Jiangsu Health CommitteeH2019072;Science and Technology Plan Project of NantongMS22018006, MS12019018, MS12019020, MSZ19177

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：659-665