病毒灭活处理对2019新型冠状病毒核酸检测弱阳性结果的影响

摘要：

目的:探讨病毒灭活处理对2019新型冠状病毒核酸检测弱阳性结果的影响。方法:回顾性研究浙江大学医学院附属第二医院2020年1至2月2019新型冠状病毒不同浓度的3例实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）核酸检测阳性患者的鼻咽拭子标本。采用不灭活处理和56 ℃ 30 min水浴、56 ℃ 60 min干浴及60 ℃ 30 min干浴3组灭活处理方式对鼻咽拭子保存液标本进行病毒灭活，提取RNA，然后3种商品化新型冠状病毒核酸实时荧光RT-PCR试剂分别进行检测，用循环阈值（Ct）评价病毒灭活对2019新型冠状病毒核酸检测结果影响。结果:灭活前ORF1ab基因Ct值分别为23.28±0.28、25.25±0.25、28.93±0.44、32.06±0.47、35.20±0.38、32.89±0.38、36.24±0.23、33.30±0.46，灭活后ORF1ab基因Ct值分别为灭活组1：23.60±0.20、27.29±0.30、31.83±0.51、37.41±0.46，灭活组2：24.25±0.34、27.18±0.42、31.84±0.61、34.99±1.01、34.89±0.45，灭活组3∶23.37±0.17、26.89±0.52、32.05±0.50；灭活前N基因Ct值分别为24.38±0.09、26.64±0.11、30.35±0.12、33.29±0.33、36.93±0.11、34.50±0.12、35.63±0.12，灭活后N基因Ct值分别为灭活组1：24.66±0.11、28.52±0.14、32.71±0.14、37.00±0.13，灭活组2：25.41±0.10、28.79±0.15、33.29±0.28，灭活组3：23.37±0.11、28.68±0.11、33.54±0.13、37.18±0.23。灭活前后扩增Ct值比较差异无统计学意义（ORF1ab基因：
t=-1.416；N基因：
t=-1.379，
P均>0.05），3组灭活处理组间Ct值差异也无统计学意义（ORF1ab基因：
t=-0.460；N基因：
t=-0.132，
P均>0.05）。但不同稀释倍数下的灭活组（1，2，3）与未灭活组Ct值比较，未灭活组和灭活组（1，2，3）Ct值差异有统计学意义。10×稀释：ORF1ab Ct值：未灭活组：25.25±0.25，灭活组1，2，3分别为27.29±0.30、27.18±0.42和26.89±0.52，t（ORF1ab）=-7.327，
P<0.01；N基因Ct值：未灭活组：26.64±0.11，灭活组1，2，3分别为28.52±0.14、28.79±0.15和28.68±0.11，
t（N）=-19.340，
P<0.01。100×稀释：ORF1abCt值：未灭活组：28.93±0.44，灭活组1，2，3分别为31.83±0.51、31.84±0.61和32.05±0.50，
t（ORF1ab）=-9.462，
P<0.01；N基因Ct值：未灭活组：30.35±0.12，灭活组1，2，3分别为32.71±0.14、33.29±0.28和33.54±0.13，
t（N）=-18.583，
P<0.01。灭活后2019新型冠状病毒核酸检测阳性率下降，未灭活组阳性检出率（7/11、8/11、5/11）和灭活组（灭活组1：4/11、4/11、3/11，灭活组2：3/11、3/11、3/11，灭活组3：3/11、3/11、2/11）比较，差异有统计学意义（
Z=-2.670，
P<0.01），不同灭活组之间（灭活组1：4/11、4/11、3/11，灭活组2：3/11、3/11、3/11，灭活组3：3/11、3/11、2/11）差异无统计学意义（χ
2=4.413，
P>0.05），3种试剂阳性检出率比较（试剂1：7/11、4/11、3/11、3/11，试剂2：8/11、4/11、3/11、3/11，试剂3：5/11、3/11、3/11、2/11），差异无统计学意义（χ
2=1.199，
P>0.05）。
结论:病毒灭活处理会使2019新型冠状病毒核酸降解，导致检测Ct值增加，使低浓度标本出现假阴性结果。

关键词：冠状病毒属、病毒灭活、核酸类、实时聚合酶链反应

所属期刊栏目：43

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金81902156;Youth Science Foundation Project of National Natural Science Foundation of China81902156

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：358-363