10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2016.07.011
米卡芬净对铜绿假单胞菌体外抑菌活性研究
目的:筛选、构建铜绿假单胞菌生物被膜体外模型,观察米卡芬净单用、联用美罗培南,对铜绿假单胞菌浮游相、被膜相细菌的体外作用效果。方法使用微孔板构建被膜体外模型、结晶紫比色法,筛选出中南大学湘雅医院2012年7月临床分离的10株铜绿假单胞菌成膜阳性株,并对被膜形成过程进行半定量分析及形态学观察。使用微量肉汤稀释法测定米卡芬净、美罗培南对铜绿假单胞菌(浮游相、被膜相)的最低抑菌浓度,观察成膜后细菌耐药性的改变。使用微量肉汤稀释法结合结晶紫比色法,观察米卡芬净单用、联用对菌株被膜形成的抑制和破坏成熟被膜的效果。使用SPSS 18.0软件分析,采用t 检验比较药物处理组与阳性生长对照组吸光度值的差异,P <0.05为差异有统计学意义。结果筛选出10株成膜阳性的铜绿假单胞菌临床菌株;菌株形成被膜后,美罗培南MIC 上升4~128倍,未能测得米卡芬净的 MIC;米卡芬净对9株菌株(PA1~PA9)被膜形成具有抑制作用,米卡芬净的最低有效浓度分别为:156.25、625、10000、2500、1250、2500、1250、625、10000 mg/L,最低有效浓度组与其阳性生长对照组的吸光度分别为:0.342±0.020与0.491±0.027、0.512±0.018与0.627±0.043、0.862±0.021与1.155±0.027、0.731±0.028 与0.863±0.017、0.311±0.003与0.447±0.021、0.435±0.021 与0.597±0.011、0.520±0.012 与0.605±0.027、0.611±0.059与0.734±0.017、0.223±0.011 与0.343±0.037, P 值分别是:0.02、0.03、0.00、0.01、0.01、0.00、0.03、0.01、0.03,差异具有统计学意义;米卡芬净对7株菌株(PA1、PA2、PA4~PA8)成熟被膜显示出破坏作用,米卡芬净的最低有效浓度分别为:2500、2500、5000、2500、5000、2500、5000 mg/L,最低有效浓度组与其阳性生长对照组的吸光度分别为:1.459±0.014与1.534±0.020、1.279±0.020与1.431±0.007、1.365±0.024与1.467±0.065、1.322±0.028与1.530±0.090、0.920±0.004与1.047± 0.013、1.860±0.005与1.953±0.055、1.407±0.005与1.553±0.045, P 值分别是:0.01、0.01、0.02、0.01、0.00、0.03、0.02,差异有统计学意义;米卡芬净与美罗培南联用可较好的抑制被膜的形成。结论米卡芬净具备抑制铜绿假单胞菌被膜形成、破坏成熟被膜的功效;米卡芬净联合美罗培南作用于多耐药铜绿假单胞菌,对被膜形成抑制能力较好。
铜绿假单胞菌、棘白菌素类、生物膜、体外研究
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R97;R51
湖南省教育厅科研基金湘教通[2012]594号;湖南省卫生厅课题B2014-014Fund program Scientific Research Funds of Hunan Province Education Department Xiangjiaotong [2012]No.594; Project of Hunan Province Health Department B2014-014
2016-08-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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