血友病A患者F8基因突变检测方法的建立及临床应用

摘要：

目的：应用 Ion Torrent 半导体测序技术建立血友病 A（HA）的 F8基因致病突变检测方法并探讨其临床应用价值。方法方法学建立。应用长距离 PCR（LD－PCR）对9例 HA 患者进行 F8基因22号内含子倒位和1号内含子倒位检测，倒位阴性患者应用 Ion Torrent 半导体测序技术检测 F8基因致病突变，对发现的致病突变进行 Sanger 测序验证。对8个家系中11例女性受检者进行 HA 携带者检测，并对其中1例孕妇进行胎儿产前基因检测。结果患者检测发现4例错义突变（c．1331A＞C， c．1648C ＞T， c．6506G ＞A， c．6544C ＞T），2例移码突变（c．2393＿2394insT， c．6320delG），1例剪接突变（IVS5＋5G ＞A），1例无义突变（c．43C ＞T），1例内含子22倒位突变。在11例女性受检者中，10例为携带者，1例不携带母源致病突变。 对 1例患病高风险胎儿进行产前基因检测，结果表明胎儿未遗传母亲致病突变。 Sanger 测序验证结果证实8个突变位点真实存在，与高通量测序结果一致。结论成功建立了基于 Ion Torrent 半导体测序技术检测 F8基因突变的方法，该方法检测周期短、通量大，是 F8基因突变筛查的有效方法。

关键词：血友病 A、基因Ⅷ、突变

所属期刊栏目：39

分类号：R55;R5

资助基金：江苏省医学创新团队与领军人才课题 LJ201109；江苏省临床医学科技专项BL2012039；江苏省自然科学基金BK20141076；江苏省卫生厅科技项目H201343， F201216Fund Program Medical Leading Talent and Innovation Team Project of Jiangsu Province LJ201109；Key Technology R＆D Program of Jiangsu Province BL2012039； Jiangsu Provincial Natural Science Foundation BK20141076； Foundation of Department of Health of Jiangsu Province H201343， F201216

在线出版日期：2016-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：496-500