NT-proBNP 侧向免疫层析荧光定量检测方法的建立及性能评价

摘要：

目的：建立适用于POCT的人血清N末端B型钠尿肽原（NT-proBNP）荧光定量检测方法。方法采用免疫荧光双抗体夹心法，研制快速定量检测人血清中NT-proBNP的免疫层析检测试剂盒；通过检测线性、精密度、准确度、特异性、稳定性等指标进行试剂盒的实验室性能评估；并选取2013年2月至2014年4月广东省第二人民医院、中山大学孙逸仙纪念医院和郑州市儿童医院疑似心血管疾病患者1056例（男性605例，女性451例），采集其血清标本，通过研制试剂与参比试剂的多中心、平行比对研究进行试剂盒临床应用评估。采用相关分析、线性回归、受试者工作特征（ ROC）曲线分析、阴／阳性符合率统计学方法对数据进行统计分析。结果 NT-proBNP定量试剂报告范围为18～35000 ng／L；试剂在重复检测低、中、高3个浓度校准品的变异系数（ CV）小于15％，偏倚小于20％；标本中常见干扰物胆红素、甘油三酯、胆固醇在所测定的浓度下，测试结果的CV值可控制在15％以内，对NT-proBNP定量检测无明显影响；14个月内检测不同浓度的NT-proBNP校准品，偏倚可以控制在±20％以内，试剂有效期大于12个月；在临床样本的检测中，本试剂盒与参比试剂产品有较好的相关性（Y研制＝1.0489X参比＋121.54，R2＝0.9566，n＝1056），并且对临床血清标本定量结果的偏差无统计学意义（ Z＝0.88，P＝0.379＞0.05）；研制的NT-proBNP检测结果以参考试剂结果为标准进行比对，在2个不同cut-off 值（300和450 ng／L ）下的 ROC 曲线下面积分别为0.981和0.978。结论本研究建立的NT-proBNP免疫荧光定量层析检测方法及相应的试剂，在各项指标的评估中均达到临床检测的要求，可用于血清NT-proBNP 指标的快速检测。

关键词：肽碎片、利钠肽、脑、免疫层析法、心力衰竭、荧光

分类号：P62;O57

资助基金：国家科技部创新基金12C26214405405；广东省战略性新兴产业省级核心攻关2012A080800007

在线出版日期：2014-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：842-846