10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2014.03.005
HPLC法检测人红细胞膜总胆固醇水平及其临床应用
目的 建立人红细胞膜胆固醇高效液相色谱测定方法.方法 实验方法学研究.选择2012年9月至2013年2月间因胸闷、胸痛在南京军区南京总医院住院并行选择性冠状动脉造影患者167例分为3组:稳定性心绞痛(SAP)组76例、急性冠状动脉综合征(ACS)组46例和对照(Control)组45例.采集红细胞样品经溶血和洗涤后,在70℃氢氧化钾溶液中皂化反应.样品经正己烷-异丙醇混合溶剂提取后,以Lichrospher色谱柱为固定相,乙腈~异丙醇为流动相进行色谱等度分离,208 nm波长下定量检测.检测3组研究对象的红细胞膜胆固醇水平.多组间均数比较用Oneway ANOVA检验;相关性比较采用Spearman相关性分析.结果 在所建立的分析条件下,胆固醇色谱保留时间约为6.1 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确.胆固醇进样量在(0.05 ~2.00)μg范围与峰面积呈良好线性关系,对红细胞膜标本检测结果与胆固醇酶法检测试剂盒测定值相关良好.Control组、SAP组以及ACS组红细胞膜胆固醇水平分别为:(87.0μg/mg,75.4 ~98.9 μg/mg)、(92.9 μg/mg,83.8 ~ 109.0 μg/mg)和(173.9 μg/mg,140.0~188.8 μg/mg).统计学分析显示,ACS组与Control组和SAP组相比,CEM水平明显增高,差异均有统计学意义(t值分别为-14.44和-14.68,P均<0.01);SAP组与Control组相比,CEM水平有增高,但差异无统计学意义(t=-1.88,P>0.05).结论 成功建立了一种检测红细胞膜总胆固醇含量的方法.灵敏度高、特异、重复性较好.
红细胞膜、胆固醇、色谱法,高压液相、急性冠状动脉综合征、动脉粥样硬化
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2014-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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