F8基因大片段缺失所导致的一例重型血友病A的分子发病机制研究

摘要：

目的 对F8基因大片段缺失所导致的重型血友病A患者进行基因断裂点分析,探讨其分子发病机制.方法 筛查患者凝血功能相关指标,明确血友病A表型诊断.采用长距离PCR及序列特异PCR进行内含子22和内含子1倒位的检测,并对F8基因的所有外显子及其侧翼序列直接测序.基因步移的方法确定F8基因断裂点.断裂点特异双重PCR对携带者进行诊断.多重荧光PCR法检测6个微卫星DNA位点(F8Up226、F8Up146、F8Int13、F8Int25、F8Down48、DXS1073)多态性对家系进行遗传连锁分析验证.结果 先证者FⅧ活性＜1％,诊断为重型血友病A.患者F8内含子22及内含子1倒位均为阴性.F8基因4～7号外显子多次PCR扩增后电泳未见相应条带,其余外显子测序未发现突变.基因步移PCR扩增产物经测序发现F8基因共缺失27 685个碱基,并在断裂点融合处存在2个微小同源碱基,且插入7个碱基(CTCTTrCC).断裂点特异性双重PCR结果显示胎儿及该患者的女儿均为缺失携带者,与基因连锁分析结果相吻合.结论 F8基因4～7号外显子缺失导致患者发生重型血友病A,微小同源介导的末端连接等机制可能介导了缺失的发生.断裂点特异双重PCR为携带者的诊断提供了一个可靠的方法.

关键词：血友病A、因子Ⅷ、突变、外显子、多重聚合酶链反应

所属期刊栏目：36

分类号：R554.1;R733.7;S828

资助基金：上海市公共卫生重点学科建设项目12GWZX0202

在线出版日期：2013-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：534-537