实时荧光定量PCR检测血HBV DNA的疑难结果分析及其对策

摘要：

目的 分析实时荧光定量PCR检测血 HBV DNA过程中出现的疑难结果,并探讨制定相应的处理对策,以提高HBV DNA检测质量.方法 用实时荧光定量PCR检测温州医学院附属第一医院2008至2011年期间,115 154份血标本中HBV DNA含量,结合当次HBV DNA定量结果与历史结果、PCR扩增图、乙型肝炎血清5项指标及临床诊断,建立本实验室疑难结果复查标准,回顾性分析2008至2011年本实验室所有送检标本的疑难结果,同时用原试剂(careHBV PCR Kit)和验证复查试剂(careHBV PCR Kit V2)对1969份疑难结果标本进行复查；统计2次结果一致性和不一致的比例,并分析试剂与非试剂因素等造成2次结果不一致的比例,其中试剂因素包括无扩增曲线造成的假阴性和有扩增曲线但扩增效率低2种情况,非试剂因素包括操作污染、标本等其他因素；最后统计careHBV PCR Kit的漏检率.结果 2008至2011年共定量检测115 154份HBV DNA血标本,疑难结果标本1969份,占总检测标本的1.71％；2次结果一致的为1588份(80.65％)；2次结果不一致为381份(19.35％),其中,4年中试剂因素造成结果不一致的比例分别为18.87％、20.23％、51.33％和59.57％,呈逐年上升趋势,原试剂因素的漏检率分别为2.49％、4.08％、10.09％、14.47％,呈逐年上升趋势；4年中非试剂因素造成结果不一致所占比率分别为81.13％、79.77％、48.67％和40.43％,呈逐年下降趋势.结论 用2种不同的试剂复查疑难结果标本,可降低HBV DNA定量检测的漏检率,避免试验误差,有效保证HBV基因突变标本的HBV DNA准确定量,以正确指导乙型肝炎患者的抗病毒治疗.

关键词：聚合酶链反应、肝炎病毒、乙型、DNA、病毒

所属期刊栏目：36

分类号：R446;Q39;R512.62

资助基金：国家自然科学基金;温州市科技局项目

在线出版日期：2013-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：217-221