降钙素原荧光免疫层析定量检测方法的建立及性能评估

摘要：

目的 利用荧光免疫层析技术,建立一种适用于床旁检验(POCT)的人血清降钙素原(PCT)快速定量检测方法.方法 采用免疫荧光双抗体夹心法(1株抗体包被于硝酸纤维素膜,另1株抗体标记荧光胶乳)研制PCT荧光免疫层析定量检测试剂盒.选取2012年1至5月广州市红十字会医院疑似细菌感染患者472例,其中,男性240例,女性232例,采集其血清标本,用本试剂盒检测PCT含量,同时通过线性、精密度、准确度、特异性、稳定性试验和与国外试剂对比分析进行方法学评价与诊断性能分析.结果 PCT定量试剂报告范围为0.1～125.0 μg/L;选取两批试剂对低、中、高3个浓度质控品重复测定20次的变异系数(CV)均小于15％,偏倚可接受(P＞0.05)；标本中常见干扰物胆红素(2.0g/L)、三酰甘油(30.0 g/L)、胆固醇(15.0 g/L)在所测定的浓度下对PCT定量检测无明显影响.14个月内检测浓度为0.5、1.0、22.0、65.0 μg/L的PCT质控品,各浓度相对偏差可以控制在±20％以内,认为试剂盒有效期＞12个月.用本试剂盒与对照产品VIDAS BRAHMS PCT定量试剂盒平行检测472份临床血清标本,两种方法有很好的相关性(YVIDAS=0.180+1.006X万孚,R2=0.988,P＜0.01),并且对临床血清标本定量结果的偏差无统计学意义(Z=-1.6,P＞0.05)；以对照产品的诊断结果为标准,万孚-PCT检测结果在3个cut-off值(0.5、2.0、10.0 μg/L)下的受试者操作特征(ROC)曲线下面积分别为0.997、0.994、0.998,P＜0.01；Kappa值分别为0.899、0.905、0.973,认为两种方法的诊断结果具有较好的一致性.结论 本研究建立了PCT荧光免疫层析快速定量检测方法,各项指标均达到临床检测的要求,可用于临床血清PCT浓度的快速检测.

关键词：降钙素、荧光免疫测定、床旁诊断化验信息系统

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资助基金：国家高技术发展计划”863”计划资助项目2011AA02A103

在线出版日期：2013-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1102-1107