10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.08.006
原发性胆汁性肝硬化患者外周血NKT细胞体外活化及相关细胞因子表达分析
目的 分析与评价PBC患者外周血TCRVα24+Vβ11+NKT数量和功能状态及其与PBC发生的关系.方法 制备60例PBC患者(PBC组)和60名年龄及性别匹配健康人(健康对照组)PBMC,以FACS检测TCRVα24+Vβ11+NKT数量;以α半乳糖酰基鞘胺醇(α-galcer)和IL-2诱导PBMC中NKT的扩增活化,用ICS-FC检测细胞内表达IL-4和IFN-γ的NKT比值;用ELISpot和ELISA定量检测细胞内及上清液IL4和IFN-γ的表达量.结果 FACS检测PBC组和健康对照组TCRVα24+Vβ11+NKT扩增前后的比率分别为[0.16(0.11~0.26)]%、[0.82(0.61~0.89)]%、[0.33(0.27~0.38)]%、[27.40(23.52~33.87)]%,前组显著低于后组(Z值分别为6.563、7.707,P<均0.01).扩增活化后PBC组和健康对照组TCRVα24+Vβ11+NKT的扩增倍数分别为扩增活化前的[96.05(80.50~100.27)]倍和[134.65(121.60~142.13)]倍,PBC组明显低于健康对照组(Z=6.462,P<0.01).同时于活化后用ICS-FC检测细胞内细胞因子,PBC组和健康对照组IFN-γ+与TCRVα24+Vβ11+NKT比分别为[38.98(36.73~42.98)]%、[34.56(30.12~36.78)]%,前组显著高于后组(Z=3.158,P<0.05);PBC组和健康对照组IL-4+与TCRVα24+Vβ11+NKT细胞比分别为[0.193(0.179~0.218)]%和[34.36(30.93~38.77)]%,前组显著低于后组(Z=6.476,P<0.01).ELISpot和ELISA定量检测扩增活化后PBC组分泌IFN-γ的斑点形成细胞数(SFC)和上清液IFN-γ分泌量分别为[410(380~500)]SFC/1×106 PBMC、(67.21±11.27)ng/L,健康对照组[340(280~390)]SFC/1×106PBMC、(31.45±8.17)ng/L,前组的IFN-γ斑点形成细胞数及分泌量显著高于后组(Z=4.312,P<0.05、t=27.25,P<0.01);PBC组的IL-4斑点形成细胞数和分泌量分别为[73(60~100)]SFC/1×106PBMC、(12.65±4.17)μg/L,健康对照组[245(230~280)]SFC/1×106PBMC、(28.31±6.31)μg/L,PBC组IL-4却显著低于健康对照组(Z=5.112,P<0.01、t=25.34,P<0.01).结论 PBC组外周血TCRVα24+Vβ11+NKT数量较健康对照组明显减少,经α-galcer及IL-2体外活化后扩增倍数及分泌细胞因子IL-4的功能较健康对照组显著降低,而分泌IFN-γ能力却显著高于健康对照组,NKT数量的减少及免疫调节功能的紊乱可能是PBC发病的重要因素之一.
肝硬化、胆汁性、细胞因子类、杀伤细胞、天然
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R5(内科学)
2010-08-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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