实时荧光定量PCR检测VAD1 mRNA评估新型隐球菌性脑膜炎的疗效

摘要：

目的 建立RT-FQ-PCR检测新型隐球菌VAD1 mRNA的方法 ,探讨定量测定VAD1 mRNA用于CNM疗效评估的可行性.方法 依据GenBank收录的新型隐球菌VAD1 mRNA全序列,设计引物和TaqMan探针,建立RT-FQ-PCR检测VAD1 mRNA的方法 .检测25例CNM患者和30例其他神经系统疾病对照组患者脑脊液,评价方法 的敏感度及特异度;检测25例CNM患者急性期与恢复期脑脊液中VAD1 mRNA的表达量,分析VAD1 mRNA与CNM治疗效果的关系.结果 建立的标准曲线相关系数为-0.997 9,检测下限为101 拷贝数/μl,高、中、低浓度质粒标准品批内CV值分别为0.65%、0.89%和1.23%;RT-FQ-PCR法检测新型隐球菌的敏感度为96%(24/25),特异度为100%(30/30);急性期VAD1 mRNA表达量为3.042±0.906,明显高于恢复期的2.187±0.665,差异有统计学意义(t=4.583,P＜0.01).结论 本研究建立的RT-FQ-PCR方法 具有较高的敏感度、特异度和重复性,适合于新型隐球菌的VAD1 mRNA检测;VAD1 mRNA表达水平与CNM的治疗效果有关.

关键词：脑膜炎、隐球菌性、隐球菌、新型、DEAD-box RNA解旋酶类、聚合酶链反应

所属期刊栏目：33

分类号：R5(内科学)

资助基金：福建省自然科学基金2008J0081;福建省自然科学基金自由申请项目X0650045;福建省教育厅科技项目JA07086

在线出版日期：2010-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：531-534