前列腺癌组织中DLC-1启动子甲基化定量检测的HRM方法建立及其应用意义

摘要：

目的 建立HRM技术定量检测DLC-1启动子甲基化的方法 ,并分析探讨DLC-1甲基化程度与前列腺癌病理参数的相关性.方法 选取89份前列腺癌组织以及10份匹配癌旁组织标本,采用LCM收集肿瘤细胞群,抽提DNA后进行甲基化修饰.以CpGenome Universal Methylated DNA作为100%甲基化样本,以100%非甲基化的健康人外周血DNA作为稀释剂,分别制成100%、80%、50%、30%、10%、0%系列浓度的标准曲线,并进行重复性和灵敏性评价.同时用HRM技术定量检测前列腺癌细胞中DLC-1甲基化水平,探讨DLC-1甲基化程度与前列腺癌患者年龄、PSA水平与前列腺癌TNM的关系.结果 100%、80%、50%、30%、10%、0%甲基化标准品的HRM熔解曲线从右往左依次排列,10份癌旁组织标本、35份前列腺癌组织标本重叠在0%标准曲线上;5份前列腺癌组织标本位于0%～30%区域内,29份位于31%～80%区域内,20份位于81%～100%区域内.HRM技术最低检测限可达10%的甲基化水平,优于MSP检测(30%甲基化水平).DLC-1甲基化水平与前列腺癌患者年龄无明显相关(X~2=3.29,P=0.19),与PSA水平也无相关性(X~2=2.04,P=0.36),但DLC-1甲基化水平与TNM分期显著相关(X~2=9.04,P=0.01),且随TNM分期增高而增高.结论 成功建立的HRM技术定量检测DLC-1甲基化水平的方法 稳定、灵敏、操作简单,DLC-1启动子甲基化有望成为评估前列腺癌TNM的分子指标.

关键词：前列腺肿瘤、肿瘤抑制蛋白质类、启动区(遗传学)、甲基化

所属期刊栏目：33

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30872590

在线出版日期：2010-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：205-208