高效毛细管电泳技术同时检测随机尿中香草扁桃酸、高香草酸和肌酐含量

摘要：

目的 建立高效毛细管电泳技术快速检测随机尿中香草扁桃酸(vanillylmandelic acid,VMA)、高香草酸(homovanillic acid,HVA)和肌酐(creatinine,Cr)的方法.方法 在毛细管区带电泳模式下,以120 mmol/L NaH_2PO_4-Na_2HPO_4(pH值6.80)为缓冲液,在非涂层石英毛细管(47 cm×75μm内径)中进行电泳.样品离心后直接稀释压力进样4 s,20 kV电压分离后通过二极管阵列检测器(DAD)检测(λ=200 nm).对该法进行系统的方法学评价后,测定健康成人及儿童随机尿标本各100份,建立成人与儿童尿VMA/Cr、HVA/Cr参考值.结果尿中VMA、HVA和Cr在13 min内出峰.VMA、HVA和Cr分别在0～500、0～500、0～4 000 μmol/L范围内呈良好的线性,相关系数(r)在0.997 2～0.999 1之间(P<0.01),检出限(S/N=3)分别为1.0、1.0和50.0 μmol/L.尿中VMA、HVA和Cr迁移时间的平均批内(n=10)变异系数(CV)分别为0.58%、0.56%和0.25%,平均批间(n=10)CV分别为0.95%、1.00%和0.48%;峰面积的平均批内(n=10)CV分别为3.78%、3.97%和2.76%,平均批间(n=10)CV分别为4.60%、4.08%和4.42%.VMA、HVA和Cr平均回收率分别为98.36%、93.56%和98.85%.儿茶酚胺、5-羟色胺和清蛋白等对测定结果无干扰.该法与HPLC法有较好的相关性,VMA、HVA浓度的相关系数(r)分别为0.954 9(P<0.01)和0.945 1(P<0.01).健康成人与儿童随机尿标本的VMA/Cr、HVA/Cr比值均呈偏态分布(n=100),以百分位数法建立其95%参考值,成人VMA/Cr、HVA/Cr分别为0～4.26和0～1.69(μmol/mmol),儿童VMA/Cr、HVA/Cr分别为0～10.39和0～4.31(μmol/mmol).结论 该法可同时检测随机尿中VMA、HVA和Cr,样品用量少,且稀释后直接进样,操作简便、快速,准确度和精密度高,易于自动化,是尿液VMA、HVA常规检测及相关疾病筛查的理想方法.

关键词：电泳、毛细管、香草扁桃酸、高香草酸、肌酸、尿

所属期刊栏目：32

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2009-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1148-1154