应用噬菌体展示技术筛选血型A抗原表位的模拟多肽

摘要：

目的 筛选血型A抗原表位的模拟多肽,探讨其在血型A抗体检测中的应用价值.方法 用血型A抗原特异性单克隆抗体NaM87-1F6从噬菌体随机12肽库中筛选能与之结合的噬菌体展示肽.采用噬菌体ELISA、噬菌体微筛选试验鉴定噬菌体与抗体的结合力.DNA测定并推断特异性噬菌俸克隆展示的多肽序列.凝集抑制试验检测单克隆噬菌体对抗体凝集红细胞的抑制作用,ABO-ELISA初步分析噬菌体展示多肽检测血型抗体的效能.结果 经筛选和鉴定后得到7个阳性克隆,其中6个展示多肽序列为EYWYCGMNRTGC(C5),1个为QIWYERTLPFTF(C17).凝集抑制试验提示2个噬菌体展示多肽可以特异性抑制NaM87-1F6对A型红细胞的凝集作用.基于噬菌体多肽C5、C17的ABO-ELISA检测血浆抗A抗体试验的受试者操作特性曲线下面积分别为0.889(P=0.000)和O.751(P=0.000),ABO-ELISA值与凝集试验抗体滴度间的Spearman相关系数分别为0.743(P＜0.01)和0.664(P＜0.01).基于C5的ABO-ELISA在临界值为0.300时其敏感度、特异度分别为82.2%和83.3%;基于C17的ABO-ELISA在临界值为0.250时其敏感度、特异度分别为68.9%和63.3%.结论 多肽EYWYCGMNRTGC,QIWYERTLPFTF可以模拟血型A抗原的表位.基于这些多肽的ABO-ELISA方法具有检测血型A抗原特异性抗体的潜能.

关键词：ABO血型系统、血型抗原、表位、肽库、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：31

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2008-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：440-445