短发夹RNA靶向抑制环氧化酶-2基因表达对肺癌细胞A549增殖的影响

摘要：

目的 评价短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)靶向肺癌细胞A549环氧化酶-2(COX-2)基因表达的抑制作用,并观察对肺癌细胞A549生长和细胞周期的影响.方法 将抑制COX-2基因的shRNA DNA模板插入到真核表达载体pGenesil-1的U6启动子下游,构建靶向抑制COX-2基因的重组表达载体pshRNA-COX-2.将试验分为3组:未转染肺癌细胞A549组、阴性对照HK组和pshRNA-COX-2转染组.用脂质体LipofectamineTM2000转染肺癌细胞A549,逆转录(RT)-PCR和免疫印迹法(Wb)分别检测COX-2基因mRNA和蛋白表达情况,流式细胞术检测细胞周期,细胞计数检测细胞生长变化.结果 与阴性对照组相比,pshRNA-COX-2重组表达载体抑制COX-2 mRNA及蛋白表达的抑制率分别为72.2%和48.6%;Go-G1期细胞由63.7%上升为71.0%,S期细胞由26.5%下降为20.0%;细胞生长明显减慢.结论 pshRNA-COX-2重组表达载体能显著抑制肺癌细胞COX-2表达,引起G0-G1期细胞增多,S期细胞减少,从而抑制肺癌细胞生长.

关键词：肺肿瘤、基因表达、短发夹RNA

所属期刊栏目：30

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：重庆市自然科学基金2006BB5271

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1172-1175