10.3760/j.issn:1009-9158.2007.05.023
戊型肝炎病毒pb166-GST融合蛋白的表达、纯化及鉴定
目的 利用谷胱甘肽S转移酶(GST)融合基因表达系统表达、纯化及鉴定HEV pb166-GST融合蛋白,为研制戊型肝炎诊断抗原探索新的途径.方法 由本室制备的重组大肠杆菌(E.coli)BL21株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导HEV pb166-GST融合蛋白表达,用BD Biosience GST蛋白纯化系统对重组蛋白进行纯化,采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Western blot对纯化的蛋白进行鉴定,并对实验条件和结果进行分析.结果 在LB培养液中的E.coli BL21株能稳定、高效表达HEV pb166-GST融合蛋白;纯化后的成分单一,仅在43 000处有表达,该蛋白能被GST特异性抗体识别.结论 我们的方法可获得高效的重组HEV pb166-GST融合蛋白,为进一步研制戊型肝炎诊断性抗原奠定了基础.
肝炎病毒、戊型、重组融合蛋白质类、大肠杆菌
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R5(内科学)
广东省深圳市科技计划JH200507120962A;深圳市福田区科技计划项目FT200529
2007-12-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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