血清MMP9蛋白ELISA检测方法的建立及在肝癌患者血清检测中的初步应用

摘要：

目的 建立基质金属蛋白酶9(MMP9)的双抗体夹心ELISA检测方法,探讨血清中MMP9在正常人及肝癌患者中的差异.方法 从人肝组织中经过反转录扩增出MMP9基因721～1 156 bp区段,插入到原核表达质粒pQE30中,在大肠埃希菌M15中诱导蛋白表达.以纯化的融合蛋白HIS-MMP9为抗原免疫实验用兔及豚鼠,得到的MMP9抗血清经过纯化后,建立双抗体夹心ELISA法.对227份正常及193份肝癌患者血清中的MMP9进行检测.结果 SDS-PAGE显示所表达的HIS-MMP9融合蛋白相对分子质量约为17 000;以原核表达蛋白为抗原制备的MMP9抗血清可有效地识别重组MMP9和中性粒细胞和HepG2细胞内源性MMP9蛋白;利用建立的MMP9 ELISA检测技术发现肝细胞癌患者血清中MMP9的含量高于正常人群,差异具有统计学意义,P＜0.001.结论 建立的双抗体夹心ELISA方法可用于血清MMP9的检测,为建立以MMP9为检测指标的肝细胞癌患者转移复发筛查方法提供了科学基础.

关键词：癌、肝细胞、基质金属蛋白酶类、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：30

分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA215021

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：288-291