10.3760/j:issn:1009-9158.2006.12.018
细胞固定技术在两种细胞共同培养研究中的应用
目的 探讨细胞固定对鉴别支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞两种细胞共同培养过程中细胞代谢产物来源的作用及其机制.方法 用1%多聚甲醛固定嗜酸粒细胞和支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞;通过锥虫蓝、伊红细胞染色,观察多聚甲醛固定对细胞形态、结构、活力和与正常细胞接触培养过程中与正常细胞黏附能力的影响;用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法定量分析固定细胞与正常细胞共同培养过程中对白细胞介素(IL)-6释放的影响.结果 多聚甲醛固定后支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞均变为死亡细胞,但其形态、结构及嗜酸粒细胞中颗粒着色无明显变化;多聚甲醛固定的BEAS-2B细胞与正常及固定的嗜酸粒细胞接触培养仅有极少量细胞发生黏附,而多聚甲醛固定的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞接触培养则有较大数量的细胞发生黏附,但黏附细胞数量少于两种正常细胞的共同培养;固定后的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞共同培养过程中可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6.但与嗜酸粒细胞单独培养比较,固定后BEAS-2B细胞与正常嗜酸粒细胞共同培养对细胞培养上清液中IL-6浓度无明显影响.结论 经多聚甲醛固定后,细胞死亡并丧失其代谢功能,但其表面仍保留可诱导其他细胞活化的结构成分,此技术可用于两种或多种细胞共同培养过程中代谢产物来源的鉴别.
上皮细胞、嗜酸细胞、白细胞介素6、酶联免疫吸附测定
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R3(基础医学)
香港研究项目CUHK4281/04M;解放军医药卫生科研项目06H045
2007-01-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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