10.3760/j:issn:1009-9158.2006.09.016
炭疽芽孢杆菌特异性基因序列双重TaqMan聚合酶链反应快速检测体系的建立
目的 以炭疽芽孢杆菌的主基因和致病毒素基因pagA特异性序列为检测标志,建立高敏感、高特异的荧光双重实时TaqMan聚合酶链反应快速检测体系.方法 根据炭疽杆菌主基因组特异性序列(GS)和特异的毒力岛pagA基因序列(Pag)设计引物及探针,通过构建目的质粒获得标准模板,利用TaqMan标记探针和便携式Smartcycle实时聚合酶链反应检测平台探讨该检测体系的检测敏感性和特异性.结果 该体系炭疽芽孢杆菌的检测敏感度为102拷贝每反应体系,与其他蜡样杆菌群细菌未出现非特异性扩增,具有较高的特异性.整个反应在1 h内完成,适合于实验室或野外环境下炭疽芽孢杆菌的快速检测.结论 本研究建立的双重TaqMan实时聚合酶链反应检测体系可作为炭疽芽孢杆菌快速、准确、特异、敏感的检测手段.
芽孢杆菌、炭疽、序列分析、DNA、DNA探针、聚合酶链反应
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R4(临床医学)
国家高技术研究发展计划863计划2002AA215013
2006-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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