乙型肝炎病毒合成e基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性

摘要：

目的 合成适合酵母表达的乙型肝炎病毒(HBV)e抗原基因,在毕赤酵母中表达出高免疫反应性和特异性的重组乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg).方法 采取基因搭桥法及Taq酶聚合反应,选用酵母菌偏爱的同义密码子替换野生型e基因的部分密码子,制备合成e基因,插入pPICZαA酵母菌表达载体.携带有合成e基因的pPICZαA转化毕赤酵母菌株GS115,经甲醇诱导表达HBeAg.结果 酶切电泳及DNA测序证实合成的e基因已正确克隆到表达载体中;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、immunoblt及ELISA显示HBeAg在毕赤酵母中高效分泌表达,表达量约为63 mg/L,培养上清液ELISA测定效价1∶ 81 920,最大吸光度值达2.8;重组HBeAg与乙型肝炎病毒核心抗体间无交叉反应.结论 毕赤酵母表达系统高效分泌表达出与乙型肝炎病毒核心抗原间无交叉抗原性、具有良好免疫反应性的HBeAg.

关键词：肝炎e抗原、乙型、基因表达、毕赤酵母、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：29

分类号：R5(内科学)

资助基金：广东省自然科学基金021858

在线出版日期：2006-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：807-812