10.3760/j:issn:1009-9158.2006.08.010
变应性哮喘鼠脾巨噬细胞Toll样受体的表达与辅助性T淋巴细胞分泌细胞因子的相关性研究
目的 研究卵清蛋白诱导的变应性哮喘(简称哮喘)模型鼠脾脏巨噬细胞Toll样受体(TLR)中TLR2和TLR4 mRNA的表达与该组织内辅助性T淋巴细胞(CD4+T)分泌的细胞因子的相互关系.方法用实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测TLR2和TLR4 mRNA与次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶管家基因(hypoxanthine-phosphoribosyl-transferase gene,HPRT)cDNA的荧光域值循环数(Ct),分别记为Ct2、Ct4和CtH,计算Ct2、Ct4与CtH的比值(Ct2/CtH、Ct4/CtH)为标本的TLR2和TLR4在mRNA水平上的相对表达量.进一步采用双标记流式细胞分析技术检测鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,随后将单克隆抗体和高尔基体转运阻断剂结合,检测CD4+T淋巴细胞胞内γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的变化.结果对照组与哮喘组小鼠Ct2/CtH差异有统计学意义(分别为1.26±0.0404,1.35±0.11,P<0.01),哮喘组TLR2 mRNA表达下调;对照组与哮喘组小鼠Ct4/CtH差异无统计学意义(分别为0.98±0.06,1.01±0.04,P>0.05);对照组与哮喘组小鼠IFN-γ和IL-4的变化差异有统计学意义[IFN-γ分别为(20.83±1.32)%,(31.78±2.54)%;IL-4分别为(2.04±0.24)%,(5.91±0.83)%,P<0.05和P<0.01],哮喘组脾脏CD4+T淋巴细胞IFN-γ和IL-4分泌增加.对照组与哮喘组小鼠IFN-γ/IL-4的比值差异有统计学意义(分别为10.30±1.05,3.58±0.39,P<0.05).结论 变应性哮喘模型鼠脾脏巨噬细胞TLR4 mRNA的表达无变化,但TLR2 mRNA的表达下调;在哮喘模型鼠脾脏CD4+T淋巴细胞中IFN-γ/IL-4比值降低.TLR2 mRNA表达的下调与IFN-γ和IL-4分泌的变化存在相关性,其机理有待进一步深入研究.
聚合酶链反应、细胞因子、哮喘、流式细胞术
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R3(基础医学)
2006-09-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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