乙型肝炎病毒前C信号肽酶裂解位点变异对HBeAg表达的影响

摘要：

目的探讨乙型肝炎病毒前C信号肽酶裂解位点变异后乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)表达的改变.方法以聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法筛检前C信号肽酶裂解位点变异的病例,经PCR扩增出编码HBeAg的前C/C区基因并克隆于EB病毒真核表达载体(EBO),以脂质体介导方法将变异株与野株分别转染HepG2细胞,利用SEAP报告系统监测转染效率,用酶联免疫吸附方法(ELISA)和免疫印迹(Western blot)方法检测转染不同病毒株的细胞外和细胞内HBeAg的量.结果转染野株的细胞培养上清经ELISA方法可检测到HBeAg阳性;而转染变异株的细胞培养上清中HBeAg为阴性.培养细胞内部以Western blot方法检测发现野株可表达三种蛋白,即HBeAg(分子量17 000)和两种HBeAg前体(22 000和25 000),而变异株只能检测到两种HBeAg前体,且变异株的HBeAg前体密度带明显比野株强.结论乙型肝炎病毒前C信号肽酶裂解位点变异后可能影响HBeAg的翻译后加工,导致大量的HBeAg前体在细胞中蓄积,这可能导致HBV感染者血清HBeAg阴性.

关键词：肝炎E抗原、乙型、聚合酶链反应、多态性、限制性片段长度

所属期刊栏目：27

分类号：R446(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金396302080;军队重点项目96Z024

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：17-19