质粒DNA抗原酶联免疫吸附试验检测抗双链DNA抗体的研究

摘要：

目的建立以质粒DNA为抗原的检测血清抗双链DNA (ds-DNA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法及探讨其临床应用价值.方法将原核表达载体质粒pBV220用碱裂解法提取纯化DNA后,按1∶ 150稀释包被在多聚-L-赖氨酸处理的微孔板上,以辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)为酶标记物,建立检测血清抗双链DNA抗体的ELISA方法.并以短膜虫为底物的间接免疫荧光法(IIF)为参比方法,对64例系统性红斑狼疮(SLE)、8例混合性结缔组织病、17例类风湿性关节炎患者的血清抗ds-DNA抗体进行对比检测.结果紫外分光法于波长260 nm测DNA浓度为1.54 g/L.ELISA抗ds-DNA法和IIF法检测3组患者阳性率分别为23.4%和17.2%、12.5%和12.5%、11.8%和5.9%,符合率分别为93.8%、100%、94.1%.以经典IIF法为金标准,ELISA检测抗ds-DNA抗体的特异性为93.4%,敏感性为100%.结论用质粒DNA作抗原建立的检测血清抗ds-DNA抗体具有良好的精密度、敏感性和特异性,检出率高于IIF法,有助于对SLE的诊断和病情活动程度进行监测.

关键词：质粒DNA、酶联免疫吸附试验、抗双链DNA抗体

所属期刊栏目：26

分类号：R44;R593(诊断学)

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：374-376