腺病毒介导的Dectin-1基因小鼠呼吸道表达模型的构建和评价

摘要：

目的：研究采用气管内注射给予Dectin?1重组腺病毒的方法建立气道Dectin?1上调表达小鼠模型，并进行模型验证和安全性评价．方法：BALB／c小鼠分为PBS组、Ad?EGFP （ recombinant adenovirus encoding EGFR ）组、 Ad?mDectin?1（recombinant adenovirus encoding murine Dectin?1）组，经气管给予 PBS、Ad?EGFP、Ad?mDectin?1．通过 real?time PCR、免疫组化等方法动态评估肺组织Dectin?1表达变化．通过ELISA检测肺组织匀浆及血液中IL?6水平，激光共聚焦检测腺病毒载体在肺组织及肝脏的分布．结果：气管内给药后，在第3天可以观察到Ad?mDectin?1组小鼠肺组织Dectin?1 mRNA水平约为PBS组、Ad?EGFP 组的18倍． Ad?mDectin?1组与对照组比较，差异具有统计学意义（ P＜0．05）．给药后第3、5、7、14天， Ad?mDectin?1组免疫组化见 Dectin?1主要定位于细支气管．随时间推移，Dectin?1水平逐渐增高，第5天达高峰，第14天气道上皮细胞仍有Dectin?1表达．给药后第3天，激光共聚焦显微镜观察Ad?mDectin?1显示在肺组织中Ad?mDectin?1组及Ad?EGFP组可见绿色荧光，而PBS组未见绿色荧光．在肝脏组织中，各组均无绿色荧光蛋白表达．肺组织及血清中IL?6水平检测示各组差异无统计学意义（P＞0．05）．结论：通过气管内给予 Ad?mDectin?1成功上调小鼠肺组织 Dectin?1水平， Dectin?1主要表达于细支气管上皮细胞，表达高峰在第5天，可持续2周以上．另外，经气管给予Ad?mDectin?1对小鼠生存和活动无明显影响，无明显炎症反应及远隔器官肝脏的播散．

关键词：Dectin-1、腺病毒载体、基因治疗、侵袭性肺曲霉病、天然免疫

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分类号：R511.8(传染病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81270064，81500073;南京市医学科技发展一般项目YKK13089

在线出版日期：2017-02-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：30-34