泛素特异性肽酶22在结直肠癌多药耐药中的作用及与多药耐药基因P-糖蛋白的相关性

摘要：

目的:探讨泛素特异性肽酶22（USP22）在结直肠癌多药耐药中的作用以及与多药耐药基因P-糖蛋白（P-gp）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）的相关性。方法:筛选USP22低表达的结直肠癌细胞系RKO、SW480，转染USP22过表达质粒使USP22表达上调。用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测USP22对结直肠癌细胞奥沙利铂耐药的影响。用相同的奥沙利铂浓度处理细胞，Western 印迹检测细胞中凋亡相关蛋白cleaved-caspase3、Bcl-2和耐药蛋白MRP1、P-gp的表达。细胞外排实验检测上调USP22对钙黄绿素AM（Calcein-AM）和罗丹明123（rhodamine123）的影响。免疫组化方法检测奥沙利铂化疗敏感组与耐药组中USP22、MRP1及P-gp的表达以及分析USP22与MRP1及P-gp的相关性。结果:CCK-8实验结果表明，SW480-USP22（SW480细胞过表达USP22）对奥沙利铂处理24 h和48 h的IC
50为（4.62±0.05）μmol/L和（2.32±0.04）μmol/L，与对照细胞相比分别高2.7倍和3.0倍。用1.25 μmol/L的奥沙利铂处理细胞48 h，USP22过表达可抑制SW480细胞凋亡；细胞外排实验中SW480-USP22组Calcein-AM和rhodamine123的荧光强度与对照细胞相比明显升高，差异有统计学意义（均
P<0.01）；SW480-USP22细胞中MRP1和P-gp的蛋白表达水平与对照细胞相比显著增加，差异有统计学意义（均
P<0.01）。免疫组化结果表明，奥沙利铂化疗敏感组USP22、MRP1、P-gp的阳性表达率和化疗耐药组相比显著降低，差异有统计学意义（
P<0.05），USP22与MRP1、P-gp在结直肠癌组织中的表达均呈正相关（
r1=0.377，
r2=0.423，
P<0.05）。
结论:USP22上调与结直肠癌细胞对奥沙利铂的获得性耐药有关，USP22可能通过调控P-gp、MRP1的表达参与结直肠癌铂类化疗耐药的过程。

关键词：结直肠肿瘤、泛素特异性肽酶22、多药耐药、奥沙利铂

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资助基金：嘉兴市科技计划项目2019AD32122;嘉兴市医学重点学科2019-zc-01;嘉兴市科技计划项目2018AD32099;Jiaxing Municipal Science and Technology Project2019AD32122;Medical Key Discipline of Jiaxing2019-zc-01;Jiaxing Municipal Science and Technology Project2018AD32099

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3944-3949