stomatin蛋白表达对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的:探讨stomatin蛋白表达对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用实时定量PCR检测人支气管肺上皮细胞（HBE）和人肺癌细胞（H520、A549、95D、H460、Glc-82、973和H1299）stomatin mRNA表达水平。采用免疫组织化学染色检测4张肺癌组织芯片（含259份人肺癌及其癌旁组织）stomatin蛋白表达情况。敲降A549细胞stomatin基因表达后，噻唑蓝比色法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，Western印迹法检测细胞中总蛋白激酶B（AKT）和丝氨酸473位点磷酸化AKT的表达水平。采用BALB/c裸鼠皮下成瘤实验检测敲降stomatin蛋白表达对A549细胞成瘤能力的影响，采用组织芯片染色检测肿瘤组织中stomatin蛋白、核增殖抗原（Ki67）及血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）表达情况。结果:H520、A549、95D、H460、Glc-82、973、H1299和HBE细胞stomatin mRNA表达水平
M（极差）分别为2.71（2.66）、3.55（3.16）、0.26（0.22）、2.08（1.98）、0.87（0.35）、1.72（2.53）、1.10（1.82）和0.01（0.02），H520、A549和H460细胞高于HBE细胞（
P值均<0.05），95D、Glc-82、973、H1299与HBE细胞差异无统计学意义（
P值均>0.05）。stomatin蛋白在人肺癌组织的表达阳性率为34.7%（90/259），高于正常组织[1.9%（5/259）]（
P<0.05）。stomatin表达阳性肺癌组织中，低表达组（67例）肿瘤大小
M（
IQR）为[41.22（2 761.50）]cm，小于高表达组[23例，57.98（1 333.50）cm]（
P<0.05）。敲降stomatin基因表达的A549细胞第4天的吸光度值为0.55±0.07，低于对照细胞（0.79±0.16）（
P=0.012）；早期凋亡细胞占比[
M（
IQR）]为8.83（53.00），高于对照细胞[4.17（25.00）]（
P=0.026）；丝氨酸473位点磷酸化AKT蛋白表达水平为0.68±0.16，低于对照细胞（1.16±0.39）（
P<0.05），AKT总蛋白表达水平
M（
IQR）为4.25（17.00），与对照细胞[4.75（19.00）]差异无统计学意义（
P>0.05）；将敲降stomatin基因表达的A549细胞接种裸鼠腋下43 d后，肿瘤体积为（37.93±3.12）mm
3，小于对照组[（454.04±32.39）mm
3]（
P<0.001），肿瘤组织stomatin、Ki67和CD31表达水平分别为1.78±0.69、5.19±3.84和10.77±1.67，均低于对照组（分别为17.52±8.76、54.14±41.02和19.72±6.97）（
P值均<0.05）。
结论:stomatin可通过调控AKT信号通路促进肺癌细胞增殖并抑制细胞早期凋亡。

关键词：肺肿瘤、细胞增殖、细胞凋亡、红细胞膜整合蛋白

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资助基金：国家自然科学基金81602576;国家重点研发计划2016YFA0201503;National Natural Science Foundation of China81602576;National Key R&D Program of China2016YFA0201503

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2518-2524