沉默FABP3基因对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡和内质网应激的影响

摘要：

目的 探讨沉默脂肪酸结合蛋白3(FABP3)基因对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡和内质网应激的影响.方法 根据处理方法,将A549细胞分为对照组(A549细胞正常培养24 h)、LPS组(10 mg/L的LPS处理A549细胞24 h)、LPS+乱序无意义阴性序列(si-con)组(LPS+si-con组,10 mg/L的LPS处理转染si-con的A549细胞24 h)和LPS+FABP3的小干扰RNA(si-FABP3)组(LPS+si-FABP3组,LPS作用转染si-FABP3的A549细胞24 h),实时荧光定量PCR检测FABP3 mRNA的相对表达量,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹法检测FABP3、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的caspase-3、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子4(ATF4)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化的caspase-12和磷酸化的蛋白激酶激酶B(p-Akt)和PI3K催化亚基p110α(PI3Kp110α)蛋白的相对表达量,酶联免疫吸附法检测白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 LPS组FABP3蛋白和mRNA相对表达量、细胞凋亡率和IL-6、IL-8、TNF-α水平以及活化的caspase-3、GRP78、ATF4、CHOP、活化的caspase-12、p-Akt和PI3Kp110α蛋白相对表达量均显著高于对照组[(1.00±0.09)比(0.53±0.05)、(2.15±0.22)比(1.00±0.10)、(26.1±2.6)％比(4.5±0.5)％、(554.4±55.4)比(75.4±7.5)ng/L、(389.3±38.5)比(25.2±2.5)ng/L、(601.3±60.0)比(66.5±6.7)ng/L、(1.00±0.11)比(0.34±0.05)、(1.05±0.11)比(0.35±0.05)、(1.20±0.12)比(0.43±0.05)、(1.05±0.10)比(0.37±0.04)、(1.10±0.11)比(0.45±0.05)、(0.88±0.08)比(0.16±0.04)、(0.75±0.08)比(0.35±0.05),均P<0.05].LPS组细胞存活率[(50.1±5.4)％]和CyclinD1蛋白相对表达量(0.40±0.05)均显著低于对照组[(100.1±12.4)％、(1.25±0.12)](均P<0.05).LPS+si-FABP3组细胞存活率[(89.1±8.5)％]和CyclinD1蛋白相对表达量(1.15±0.11)均显著高于LPS+si-con组[(53.1±5.4)％、(0.42±0.05)](均P<0.05).LPS+si-FABP3组细胞凋亡率[(10.5±1.1)％]、IL-6[(301.3±30.0)ng/L]、IL-8[(189.4±19.0)ng/L]、TNF-α[(400.1±40.1)ng/L]、活化的caspase-3(0.45±0.05)、GRP78(0.48±0.05)、ATF4(0.60±0.06)、CHOP(0.55±0.05)、活化的caspase-12(0.60±0.06)、p-Akt(0.50±0.05)和PI3Kp110α(0.45±0.05)蛋白相对表达量均显著低于LPS+si-con组[(28.1±2.8)％、(536.3±53.6)ng/L、(400.2±40.2)ng/L、(623.1±62.3)ng/L、(0.96±0.10)、(1.02±0.10)、(1.15±0.12)、(1.10±0.11)、(1.15±0.12)、(0.90±0.09)、(0.72±0.07)](均P<0.05).结论 沉默FABP3基因可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡和内质网应激,其可能通过抑制PI3K/Akt信号通路发挥作用.

关键词：肺泡、上皮细胞、脂肪酸结合蛋白质类、细胞凋亡、内质网应激

所属期刊栏目：99

分类号：J0-;R-3

资助基金：河南省科技厅科研项目182102310133 Henan Science and Technology Department Project 182102310133

在线出版日期：2020-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3808-3813