构建模拟人散发性结直肠癌及其肝转移的小鼠模型

摘要：

目的 构建模拟人散发性结直肠癌(CRC)发生发展及其肝转移的Apcloxp/loxp+KrasLSL-G12D/-+ Smad4loxp/loxp转基因小鼠模型.方法 将C57BL/6-Apctm1Tyj/ (ApcloxP)、B6.129S4-Krastm4Tyj/J(KrasLSL-GI2D)及129S6-Smad4tm2.1Cxd/J (Smad4loxP)、C57BL/6J小鼠杂交并筛选出基因型为ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-和ApcloxP/loxP+ KrasLSL-G12D/-+ Smad4loxP/loxP的小鼠,以PCR和qPCR鉴别小鼠基因型.实验分ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-+Smad4loxP/loxP+组(n=20)和ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-组(n=24),小鼠结肠镜下向小鼠结直肠黏膜下注射前期构建表达Cre酶和IRES-luciferase的慢病毒(LentivirusCre-IRES-luciferase),每4周小鼠腹腔注射D-luciferase,用小动物活体成像系统(IVIS)成像,对小鼠肿瘤大小、成瘤率以及转移情况进行统计分析.至20周末取小鼠肿瘤灶及转移组织行苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变情况.结果 成功培育出基因型为ApcloxP/loxP+KrasLLSL-G12D/-+Smad4loxP/loxP和ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-的转基因小鼠,转基因小鼠结直肠在LentivirusCre-IRES-luciferase的诱导下发生CRC及其肝转移,经病理组织学证实为腺癌和腺癌肝转移.Apcloxp/loxp+ KrasLSL-G12D/-+ Smad4loxP/loxP组与ApcloxP/loxP+ KrasLSL-G12D/-组小鼠原发肿瘤大小分别为(3.52±0.26)、(3.45±0.20) mm,差异无统计学意义(t=0.872,P=0.388);成瘤率分别为70.0％、50.0％,差异无统计学意义(X2=0.440,P=0.507);转移率分别为58.3％、8.3％(Fisher确切概率法,P=0.027).结论 本研究构建的转基因小鼠结直肠可在LentiviruscCre-IRES-luciferase的诱导下发生癌变并可自发转移至肝脏,较真实地模拟了人散发性CRC的发生发展及其肝转移.

关键词：结肠直肠癌、肝转移、模型、动物、小鼠

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资助基金：国家自然科学基金81372553National Natural Science Foundation of China 81372553

在线出版日期：2019-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2701-2705