肌动蛋白相关蛋白2/3复合体在慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能中的作用

摘要：

目的 探讨肌动蛋白相关蛋白(Arp)2/3复合体在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能中的作用.方法 40只小鼠按随机数字表法分为健康对照组、健康Arp2/3复合体抑制剂(CK666)组、慢阻肺组及慢阻肺CK666组各10只,慢阻肺组和慢阻肺CK666组采用香烟烟雾暴露法建立慢阻肺模型,其对照组无烟雾暴露.造模90d后,取各组小鼠肺组织分离AM.流式细胞术测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记的大肠杆菌(FITC-E.coli)的能力,以平均荧光强度(MFI)和吞噬FITC-E.coli阳性细胞百分比(吞噬％)表示;蛋白印迹法测AM的Arp2和F-肌动蛋白表达;激光共聚焦显微镜测AM的Arp2、F-肌动蛋白、吞噬的FITC-E.coli平均吸光度及Arp2和F-肌动蛋白的共定位;扫描电镜观察AM吞噬时的形态.结果 慢阻肺组AM的MFI和吞噬％均显著低于健康对照组[(4 702±243)比(8684±234)和(32.21±1.66)％比(65.88±1.77)％,均P＜0.01];慢阻肺CK666组[(3 597±307)、(22.09±1.89)％]、健康CK666组[(7446±236)、(50.09±1.64)％]均显著低于各自的对照组(均P＜0.01).慢阻肺组AM的Arp2和F-肌动蛋白相对表达量均显著低于健康对照组(0.508±0.025比0.813±0.040和0.462±0.029比0.720±0.039,均P＜0.01);慢阻肺CK666组(0.265±0.014)、健康CK666组(0.637±0.032)F-肌动蛋白均显著低于各自对照组(均P＜0.01).慢阻肺组AM的Arp2蛋白、F-肌动蛋白、FITC-E.coli平均吸光度均显著低于健康对照组(34.43±0.56比142.83±1.90、61.59±0.70比145.93±3.05、41.49±0.33比189.17±2.60,均P＜0.01);慢阻肺CK666组(37.73±1.04、28.84±2.95)和健康CK666组(137.07±1.35、157.46±1.00)F-肌动蛋白、FITC-E.coli平均吸光度均显著低于各自对照组(均P＜0.01).慢阻肺组孟德斯共定位系数(MOC)显著低于健康对照组(0.395±0.014比0.880±0.002,P＜0.01),慢阻肺CK666组(0.297±0.006)、健康CK666组(0.737±0.031)均显著低于各自对照组(均P＜0.01).健康对照组AM伸出密集且长的丝状伪足,细胞表面突起、皱褶多;健康CK666组AM丝状伪足伸出减少且较短,表面突起、皱褶减少;慢阻肺组和慢阻CK666组AM丝状伪足伸出短小或缺失,表面突起、皱褶明显减少.基础状态和CK666干预后,AM的Arp2、F-肌动蛋白相对表达量及其MOC与MFI之间呈正相关.结论 Arp2/3复合体活性下降致慢阻肺小鼠AM吞噬功能低下,且慢阻肺小鼠AM对Arp2/3复合体抑制剂更敏感.

关键词：肺疾病、慢性阻塞性、巨噬细胞、肺泡、肌动蛋白相关蛋白2-3复合物、吞噬作用

所属期刊栏目：99

资助基金：国家自然科学基金81670033 National Natural Science Foundation of China 81670033

在线出版日期：2019-09-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2355-2361