华蟾毒精对骨癌痛大鼠镇痛作用及机制研究

摘要：

目的 研究华蟾毒精(CBG)对骨癌痛大鼠的镇痛作用及毒蕈碱受体M4亚型(M4mAChR)在其中的作用与机制.方法 100只雌性SD大鼠采用随机数字表法分为5组(n=20):假手术组(S组)、胫骨癌痛组(A组)、生理盐水+CBG溶剂组(ANS组)、生理盐水+1 mg/kg CBG组(ANC组)、Tropicamide+1 mg/kg CBG组(ATC组).S组左胫骨上端骨髓腔各注入Hank's液10μl,A组、ANS组、ANC组、ATC组左胫骨上端骨髓腔各注入Walker256癌细胞悬液10μl.模型制备成功后第9天,ANS组、ANC组、ATC组鞘内分别注射生理盐水15μl、生理盐水15μl、10 nmol M4 mAChR阻断剂Tropicamide,10 min后,ANS组、ANC组、ATC组腹腔分别注射CBG溶剂、1 mg/kg CBG、1 mg/kg CBG.造模前(T0)每组大鼠测3次取平均值作为其基础痛阈,腹腔给药前20 min (T1),给药后10 min (T2)、30 min (T3)、60 min(T4)、90 min(T5)、120 min(T6)分别测定其痛阈值.并且给药后60 min取L4～L6左侧脊髓背角和背根神经节(DRG),采用蛋白质印迹法(Western blot)检测钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱa(CaMKⅡa)、磷酸化钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱa(pCaMKⅡa)表达情况.结果 在T1～T6各时间点,S组机械痛阈值分别为(8.69±0.45)、(8.63±0.44)、(8.65±0.39)、(8.84±0.23)、(8.80±0.14)、(8.75±0.14)g,A组分别为(6.37±0.30)、(6.42±0.13)、(6.29±0.17)、(6.25±0.22)、(6.34±0.33)、(6.36±0.34)g,差异均有统计学意义(t=-16.41、-23.47、-30.25、-17.35、-19.52、-22.56,均P＜0.01);在T3～T5各时间点,ANS组机械痛阈值分别为(6.42±0.32)、(6.39±0.34)、(6.26±0.32)g,ANC组分别为(7.29±0.34)、(7.81±0.15)、(7.54±0.19)g,差异均有统计学意义(t=13.52、14.22、17.33,均P＜0.01);在T3～T5各时间点,与ANC组比较,ATC组机械痛阈值下降,分别为(6.55±0.23)、(6.84±0.46)、(6.80±0.43)g,差异均有统计学意义(t=-12.69、-11.26、-10.33,均P＜0.01).T4时间点,各组大鼠脊髓背角pCaMKⅡa表达水平分别为(0.67±0.05)、(1.64±0.12)、(1.57±0.14)、(0.78±0.09)、(1.39±0.11),DRG表达水平分别为(1.65±0.39)、(3.59±0.17)、(3.43±0.32)、(2.17±0.34)、(2.95±0.23),差异均有统计学意义(F=179.89、198.76,均P＜0.01);与S组比较,A组pCaMⅡa表达上调;与ANS组比较,ANC组pCaMKⅡa表达下调;与ANC组比较,ATC组pCaMKⅡa表达上调;CaMKⅡa在脊髓背角及DRG内各组表达差异均无统计学意义(F=1.25、2.79,均P＞0.05).结论 M4 mAChR阻断剂参与介导华蟾毒精缓解骨癌痛大鼠的痛觉过敏,其机制可能与pCaMKⅡa/CaMKⅡa信号通路有关.

关键词：骨肿瘤、疼痛、镇痛

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在线出版日期：2019-06-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1307-1311