慢性束缚应激对小鼠食管内脏敏感性的影响及其诱导食管炎症和氧化应激的作用

摘要：

目的 建立小鼠慢性束缚应激模型,探讨心理应激对食管高敏感性及食管炎症发生的作用,以及氧化应激所产生的影响.方法 20只雄性SPF级昆明小鼠随机分2组(每组10只),即慢性束缚应激(CRS)组和正常对照(NC)组.CRS组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14d.通过HE染色在光学显微镜下观察食管组织病理学改变并进行组织损伤评分.采用免疫组化方法检测瞬时电位香草酸亚型1 (TRPV-1)与还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX-4)在小鼠食管中的表达,进一步通过Western印迹检测TRPV-1蛋白表达量,并通过实时定量PCR法检测食管组织中TRPV-1、氧化蛋白、抗氧化蛋白及相关炎症因子微RNA的表达量.结果 HE染色镜下观察可见,CRS组小鼠食管黏膜可见基底细胞增生,中性粒细胞及浆细胞浸润等炎症性改变,NC组未见明显异常,并且两组小鼠食管黏膜组织上皮细胞损伤及黏膜下炎症细胞评分有差异均有统计学意义(均P＜0.05).免疫组化结果显示,TRPV-1和NOX-4阳性着色细胞在大部分标本中均可见到,但TRPV-1和NOX-4免疫染色阳性着色细胞在CRS组小鼠组织中表达较NC组染色深且丰富.Western印迹检测结果表明,CRS.组食管标本中TRPV-1蛋白质表达量较NC组高(1.0±0.0比1.6±0.2),差异有统计学意义(t=-7.06,P＜0.001).实时定量PCR实验结果表明,CRS组TRPV-1及氧化蛋白NOX-4 mRNA表达水平较NC组高,分别为1.0±0.0比2.0±0.2、1.0±0.0比2.0±0.2,差异均有统计学意义(t=-13.44、-14.32,均P＜0.001);与NC组比较,CRS组抗氧化蛋白锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)和铜锌超氧化物歧化酶(Cu Zn-SOD) mRNA表达水平较高,分别为1.0±0.0比0.7±0.1、1.0±0.0比0.7±0.1,差异均有统计学意义(t=8.39、7.36,均P＜0.05);CRS组炎症相关因子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平较NC组高,分别为1.0±0.0比2.4±0.4、1.0±0.0比1.8±0.2、1.0±0.0比2.5±0.4,差异均有统计学意义(t=-10.06、-13.24、-12.40,均P＜0.001).结论 心理应激可能通过致敏TRPV1受体介导小鼠食管高敏感性的形成,并引起食管炎症的发生.心理应激诱导的氧化应激可能参与小鼠食管高敏感性的产生.

关键词：慢性束缚应激、食管高敏感性、食管炎症、氧化应激、小鼠模型

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资助基金：新疆自治区自然科学基金2017D01C110,2018D01C134Xinjiang Natural Science Foundation2017D01C110,2018D01C134

在线出版日期：2019-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：135-141