浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注后海马内质网应激的影响

摘要：

目的 观察浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注(I/R)损伤后海马内质网应激(ERS)的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠60只,8～10周龄,体质量280～320 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、全脑缺血再灌注组(I/R组)、硫化氢组(H2S组)、浅低温组(MH组)、硫化氢+浅低温组(H2 S+MH组).采用经食管心脏起搏法诱发心跳骤停并行心肺复苏制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型.硫氢化钠(NaHS)的给药方案:于自主循环恢复即刻腹腔注射硫氢化钠2.5 mg/kg;浅低温的实施:于自主循环恢复即刻用乙醇擦拭大鼠体表,配合冰袋15 min内将直肠温度降至32～34℃,维持6 h.于再灌注72 h时行神经功能缺陷评分(NDS),处死大鼠后取海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和Caspase-12的表达;于再灌注72 h时取海马组织,行HE染色,光镜下观察海马CA1区病理学结果;采用原位DNA末端转移酶法(TUNEL)染色检测海马CA1区细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI).结果 全脑缺血再灌注损伤可诱导内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著增高,提示严重的内质网应激被激活.Sham组、I/R组、H2 S组、MH组、H2 S+MH组的GRP78含量分别为0.11±0.03、1.11±0.10、0.67±0.09、0.66±0.08、0.48±0.04,CHOP的含量分别为0.16±0.03、1.60±0.11、1.39±0.09、1.34±0.08、1.13±0.09,Caspase-12的含量分别为0.09±0.02、0.87±0.08、0.65±0.08、0.59±0.06、0.45±0.06,差异均具有统计学意义(F=147.569、264.983、119.356,均P<0.01).Sham组、I/R组、H2 S组、MH组、H2 S+MH组的细胞凋亡指数分别为(1.83±0.75)％、(53.17±4.62)％、(35.17±2.14)％、(32.67±2.25)％、(17.83±2.79)％,差异有统计学意义(F=284.962,P<0.01).Sham组、I/R组、H2S组、MH组、H2S+MH组的神经功能缺陷评分分别为0％、(76±9)％、(54±5)％、(47±6)％、(35±6)％,差异有统计学意义(F=135.218,P<0.01).结论 浅低温联合硫化氢减轻全脑缺血再灌注后海马内质网应激,联合效果优于单独应用.

关键词：浅低温、硫化氢、再灌注损伤、脑、内质网应激

所属期刊栏目：98

资助基金：国家自然科学基金81671884;南京市医学科技发展面上项目YKK15206National Natural Science Fundation of China81671884;The General Program of Nanjing Medical Science and Technology Development ProjectYKK15206

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3592-3597