血清非甲基化胰岛素DNA检测方法的建立

摘要：

目的 建立血清非甲基化胰岛素DNA的检测方法,并初步评价其临床应用价值.方法 对文献报道的Akirav法和Husseiny法反应体系进行验证和改良.同时选取2014年2月至2015年2月中南大学湘雅二医院门诊或病房诊断为1型糖尿病(T1DM)且病程1年以内的患者6例,以及年龄相匹配的健康对照8例,采用改良Akirav法检测其血清中非甲基化胰岛素DNA水平,初步评价临床应用价值.本研究方案经中南大学湘雅二医院伦理委员会批准[(2012)伦理审第(S12)号].结果 Akirav法的甲基化非依赖性PCR(MIP)反应特异性较差,无法获得目标产物;Husseiny法的甲基化特异性定量PCR(qMSP)引物扩增效率为(76.98 ±2.88)％,低于推荐的80％,结果可信度差.利用Akirav法的主要思路,结合Husseiny法中提供的引物,建立的改良Akirav法灵敏度较高,检测T1DM患者血清中的非甲基化胰岛素DNA水平高于正常对照[非甲基化指数(DI)分别为0.039(0.028 ～0.083)和0.016(0.003 ～0.029),P=0.005].结论 改良Akirav法能有效检测血清非甲基化胰岛素DNA水平,T1 DM患者血清中非甲基化胰岛素DNA水平高于健康人.

关键词：糖尿病、1型、非甲基化胰岛素DNA、诊断技术和方法

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资助基金：National Key R&D Program of China2016YFC1305000,2016YFC1305001;National Science and Technology Infrastructure Program2015BAI12B13;Hunan Provincial Science and Technology Department Project2014SK3114国家重点研发计划2016YFC1305000,2016YFC1305001;国家科技支撑计划2015BAI12B13;湖南省科技厅项目2014SK3114

在线出版日期：2018-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2393-2397