微RNA-147b抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制

摘要：

目的 探讨微RNA(microRNA,miR)-147b在食管鳞状细胞癌(以下简称"鳞癌")中的表达及其在细胞增殖、细胞周期和侵袭中的分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测食管鳞癌组织和细胞中miR-147b的表达.将阴性对照(NC)和miR-147b抑制剂转染食管鳞癌EC1和EC9706细胞.试验分为两组:NC组和miR-147b抑制剂组,采用qPCR检测上述细胞中miR-147b的表达,采用CCK-8、流式细胞术和Transwell小室检测分别检测miR-147b表达下调对食管鳞癌细胞增殖、细胞周期和侵袭的影响.利用双荧光素酶报告载体分析其直接作用的靶基因.采用qPCR和Western印迹检测miR-147b表达下调对靶基因NDUFA4表达的影响,进一步利用qPCR检测NDUFA4在食管鳞癌组织中的表达,并分析其表达与miR-147b表达的相关性.结果 食管鳞癌组织(3.03±0.27)和细胞中miR-147b的相对表达水平均显著高于癌旁组织(1.00±0.01)和正常食管上皮细胞,差异均有统计学意义(均P<0.01),并且miR-147b高表达与食管鳞癌患者的临床分期、浸润深度、组织学分级及淋巴结转移均密切相关(均P<0.05),临床分期、淋巴结转移和miR-147b是食管鳞癌患者的独立预后因素.miR-147b表达下调能显著抑制食管鳞癌细胞的增殖、静止细胞周期在G0/G1期和降低其侵袭能力.NDUFA4是miR-147b直接作用的靶基因,miR-147b抑制剂显著增加食管鳞癌EC1和EC9706细胞中NDUFA4的表达.NDUFA4在食管鳞癌组织中表达显著下调,其与miR-147b的表达负相关(r=-0.765,P<0.001).结论 miR-147b表达的下调显著抑制食管鳞癌的增殖和侵袭能力,且可以改变其细胞周期分布.

关键词：食管癌、微RNA、细胞增殖、细胞周期、肿瘤侵袭

所属期刊栏目：98

在线出版日期：2018-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2092-2098