Kruppel样转录因子2对人肝窦内皮细胞体外迁移的影响

摘要：

目的 探索Kruppel样转录因子2(KLF2)对肝窦内皮细胞(LSEC)体外迁移的影响及其机制.方法 采用慢病毒感染的方式构建过表达和干扰KLF2表达的LSEC(分别为LV5-KLF2和LV3-shKLF2),采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测病毒感染效率,未处理LSEC作为野生对照(WT)组.采用Transwell实验检测KLF2表达的改变对LSEC迁移能力的影响,荧光定量PCR和蛋白印迹法检测促迁移因子血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的表达,蛋白印迹法检测迁移相关信号通路蛋白Src,P38 MAPK,P44/42 MAPK的表达.结果 Transwell实验计数12 h细胞迁移数,过表达KLF2可抑制LSEC的体外迁移能力,LV5-KLF2组LSEC细胞迁移数目较LV5-NC和WT组少[(35.6±1.4)、(71.3±2.4)和(69.3±1.6)],差异均有统计学意义(均P ＜0.001).而下调KLF2表达后,LV3-shKLF2组LSEC的细胞迁移能力较LV5-NC和WT组增强,细胞迁移数目较对照组多[(189.5±5.4)、(83.4±2.5)和(82.2±3.4)],差异均有统计学意义(均P＜0.001).荧光定量PCR和蛋白印迹法证实过表达KLF2可抑制LSEC中促迁移因子VEGFR2的mRNA和蛋白水平的表达,而干扰KLF2则上调VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平.蛋白印迹结果提示过表达KLF2,抑制LSEC中信号通路蛋白p-Src、p-P38 MAPK及p-P44/42的表达,而干扰KLF2则促进LSEC中上述磷酸化蛋白的表达.结论 KLF2可能通过Src/MAPK通路抑制LSEC的体外迁移.

关键词：Kruppel样转录因子类、内皮细胞、细胞迁移、Src族激酶类、丝裂原活化蛋白激酶类

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资助基金：上海市自然科学基金15411950501Natural Science Foundation of Shanghai 15411950501

在线出版日期：2018-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：527-532