10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2017.39.008
miR-30a-5p靶向作用蛋白激酶B基因促进骨关节炎患者软骨细胞的凋亡
目的 观察miR-30a-5p在骨关节炎(OA)患者软骨组织中的表达及其对软骨细胞凋亡的作用机制.方法 2015年5月至2016年12月,收集南京中医药大学附属常州中医医院骨科289例OA软骨组织标本.聚合酶链反应(qPCR)检测不同患者软骨组织中miR-30a-5p以及蛋白激酶B(Akt) mRNA的表达情况,Tunel法检测软骨细胞凋亡情况,免疫印迹法组织和细胞中相关蛋白的表达,流式细胞仪检测不同细胞凋亡情况和细胞周期.结果 OA患者软骨组织miR-30a-5p相对表达量显著高于非OA[(3.64±0.95)比(1.03±0.31),P<0.05],Akt基因表达较非OA显著下调[(0.41±0.17)比(1.08±0.26),P<0.05];miR-30a-5p在OA患者软骨组织中的表达与Akt mRNA表达呈负相关(r =0.729 3,P<0.001),与细胞凋亡率呈正相关(r=0.847 5,P<0.001);在SW1353细胞内miR-30a-5p靶向负调控Akt基因表达,高表达的miR-30a-5p显著下调p-Akt,IkB-α,p-IkB-α,p65,p-p65和mTOR基因,p-mTOR蛋白表达(P<0.05);与正常SW1353细胞相比,转入miR-30a-5p-mimics的SW1353细胞凋亡率增加9.65倍,G0/G1期细胞增加1.37倍,S期细胞降低了60.94%,G2/M期细胞降低了19.53%.结论 miR-30a-5p在OA患者软骨组织中呈现高表达,并且其高表达可以通过靶向作用Akt基因而将软骨细胞阻滞在G0/G1期,进而诱导软骨细胞的凋亡.
软骨细胞、骨关节炎、软骨组织、miR-30a-5p、蛋白激酶B
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R68;R28
常州市卫生计生委青年科技项目QN201501Youth Science and Technology Project of Changzhou Health and Family Planning CommissionQN201501
2017-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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