miR－146b－5p 下调促进巨噬细胞与胶质瘤干细胞融合后恶性转化的分析

摘要：

目的：观察在巨噬细胞（ Mφ）－胶质瘤干细胞（ GSCs ）双色荧光示踪体外共培养模型中，二者间的相互作用，以多指标验证融合细胞的存在及其生物学特性，并分析相关分子机制。方法将红色荧光蛋白基因稳定转染的人GSCs细胞株SU4－RFP，与源于绿色荧光蛋白（ EGFP） Balb／c裸小鼠的Mφ体外共培养，细胞工作站下观察SU4－RFP与Mφ间的包括融合在内的多种相互作用，克隆高增殖力RFP／EGFP双阳性细胞，以免疫印迹、荧光探针原位杂交（ FISH）、免疫细胞化学染色和染色体核型分析多指标鉴定融合细胞，命名为Mφ与GSCs的融合细胞（ F－Mφ），分析其生物学特性及相关分子机制。结果体外共培养发现高增殖力EGFP／RFP双阳性细胞存在，单克隆并连续传代后在转录、翻译及荧光蛋白表达水平均证实RFP和EGFP共表达。融合细胞共表达Mφ标志物CD68和GSCs标志物Nestin，兼具两种细胞特征性染色体，证实其源于SU4－RFP与Mφ的自发融合。融合细胞的增殖速度、侵袭能力均高于SU4－RFP。融合细胞转染miR－146b－5p后，STAT3表达下降，凋亡率上升（18．83％），而致瘤率（4／5）及肿瘤体积（9．7 mm ±1．6 mm）均下降。结论 Mφ可与GSCs自发融合，融合细胞转化后恶性程度更高，与miR－146b－5p下调介导STAT3通路激活相关。

关键词：巨噬细胞、胶质瘤干细胞、恶性转化、双色荧光示踪、miR-146b-5p

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分类号：R73;R39

资助基金：国家自然科学基金81472739，81602183；江苏省自然科学基金BK20151214；中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会 CSNO－2014－MSD09；江苏省普通高校研究生科研创新计划项目KYLX15＿1230

在线出版日期：2017-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：380-386